注意事項(xiàng)：轉(zhuǎn)化前請準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱,、抗生素使用濃度,、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。

1,、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,，再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒，室溫放置1min,；

2,、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài)，置于冰盒上解凍,，并做好標(biāo)記,；

3,、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min,；

4,、42℃熱激90s，再冰浴2min,；

5,、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min,；

6,、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀,；

7,、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠,，涂勻液體,；

8、將平板正向培養(yǎng)1h,，再倒置培養(yǎng)12h~16h,；

9、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,，震蕩培養(yǎng)12h~16h,，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒