標題：DH5a-m Electrocompetent Cell，大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞

【參數(shù)信息】

英文名稱：DH5a-m Electrocompetent Cell

中文名稱：DH5a-m電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

DH5α-m是兼容DH5α和DH10B菌株的一款克隆菌株,，在其基因組中引入mcrA、mcrBC,、mrr-,、hsdRMS突變，使得從外源攝入的甲基化DNA不被降解,，從而利于甲基化DNA的克隆和擴繁,，適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA，同時提高了電轉(zhuǎn)效率,。

recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取,。

lacZΔM15的存在使其可用于藍、白斑篩選,。

本品是大腸桿菌DH5α-m菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的電擊感受態(tài),，只能用于DNA的電擊轉(zhuǎn)化，不能用于熱激轉(zhuǎn)化,。

經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率＞2×1010 cfu/μg DNA,。

【作用機制：電穿孔的分子與物理過程】

電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞的作用機制基于電穿孔 ，即利用高壓電場瞬時改變細胞膜通透性,，使外源 DNA進入細胞,。

該過程分為四個階段：

（一）膜通透性改變的物理基礎(chǔ)

水孔理論：

高壓脈沖使細胞膜脂質(zhì)雙層發(fā)生極化，形成瞬態(tài)親水性孔道,。水分子在電場驅(qū)動下穿透疏水層,，穩(wěn)定孔道結(jié)構(gòu)。

跨膜電壓臨界值：

當電場強度超過閾值,，膜電容崩潰,，導致非選擇性離子通道開放,，進一步擴大孔道。

（二）DNA 內(nèi)化的動力學過程

電泳與擴散作用：

DNA 在電場力作用下 定向遷移至孔道附近,，并通過布朗運動進入細胞,。

DNA-膜相互作用：

帶負電的 DNA 與膜脂質(zhì)極性頭基團結(jié)合，降低穿透能壘,，提高內(nèi)化效率 ,。

（三）細胞恢復與克隆形成

孔道閉合機制：

脈沖結(jié)束后，膜脂質(zhì)自發(fā)重組,，孔道在 毫秒至秒級時間內(nèi)閉合,。此過程依賴溫度。

復蘇與表達：

細胞轉(zhuǎn)移至富營養(yǎng)培養(yǎng)基,，在 37°C 振蕩培養(yǎng) 1 小時,，修復膜損傷并表達抗性基因，終涂布于含抗生素的平板篩選克隆,。

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉,。