KI小鼠模型
- 公司名稱 上海達(dá)為科生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
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- 更新時間 2025/6/30 13:58:30
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制作動物模型 細(xì)胞培養(yǎng) 分子生物學(xué)檢測 病理學(xué)形態(tài)檢測 蛋白質(zhì)技術(shù) 免疫學(xué)檢測 提供培訓(xùn)服務(wù)各種檢驗儀器設(shè)備、玻璃儀器及器具,、一次性耗材等
1. KI小鼠模型的定義與技術(shù)原理
KI(Knock-in) 指通過基因編輯技術(shù)將特定外源序列(如點突變,、報告基因,、人類基因片段)精準(zhǔn)插入小鼠基因組特定位點,實現(xiàn)對內(nèi)源基因的定向修飾,。
技術(shù)基礎(chǔ):
同源重組(ES細(xì)胞打靶) :傳統(tǒng)方法,利用胚胎干細(xì)胞進(jìn)行基因靶向,,穩(wěn)定性高但周期長(約6-8個月),。
CRISPR/Cas9:現(xiàn)代主流技術(shù),直接對受精卵編輯,,效率高,、周期短(可縮至4個月),支持大片段插入(最大300kb),。
核心目的:
模擬人類疾病突變(如亨廷頓病CAG重復(fù)擴(kuò)展)
插入報告基因(如EGFP,、tdTomato)實現(xiàn)細(xì)胞示蹤
構(gòu)建人源化模型(替換小鼠基因為人類同源序列)
2. KI小鼠模型的分類與典型品系
(1)疾病模擬型
疾病領(lǐng)域 | 代表品系 | 基因修飾 | 表型特征 |
---|---|---|---|
亨廷頓病 | HdhQ150 (UAB系列) | 人源化Htt外顯子1插入150 CAG重復(fù) | 進(jìn)行性運動障礙、神經(jīng)元包涵體 |
多系統(tǒng)wei縮 | 未命名(結(jié)腸病理模型) | 未公開突變 | 結(jié)腸壁變薄,、糖原積累減少 |
神經(jīng)肌肉疾病 | Gle1 KI | 9核苷酸插入模擬剪接突變 | 運動神經(jīng)元功能障礙 |
(2)工具型
報告基因模型:
Cubn-sGFP-P2A-nLacZ(熒光示蹤)
Tubb3-2A-EGFP(神經(jīng)元標(biāo)記)
B-CAG-tdTomato cKI(Cre依賴型紅色熒光)
條件性基因操作工具:
Trpv1-Myc-IRES-Cre(疼痛神經(jīng)元特異調(diào)控)
Trdc-IRES-CreERT2(誘導(dǎo)型T細(xì)胞編輯)
(3)人源化免疫模型
免疫缺陷宿主:NOD/LtSz-scid小鼠(缺乏T/B細(xì)胞,,NK活性低)作為基礎(chǔ),支持人免疫細(xì)胞移植,。
人免疫系統(tǒng)重建:
聯(lián)合移植人胎胸腺/肝臟組織與CD34?干細(xì)胞,,形成功能性人T/B細(xì)胞。
3. 核心應(yīng)用領(lǐng)域
(1)疾病機(jī)制解析
神經(jīng)退行性疾病:亨廷頓病KI模型揭示CAG重復(fù)長度與病理嚴(yán)重度正相關(guān),。
腫瘤研究:人源化PD-1-EGFP KI模型(B-PD-1-EGFP)用于腫瘤免疫微環(huán)境示蹤,。
代謝與器官病變:結(jié)腸特異性KI模型成功模擬人類組織wei縮和糖代謝異常。
(2)藥物研發(fā)平臺
藥效評價:人源化抗體生產(chǎn)模型(如全人源抗體KI小鼠)。
藥代動力學(xué):藥物代謝酶人源化模型(如CYP450家族替換),。
(3)前沿技術(shù)整合
活體示蹤:EGFP/tdTomato報告基因?qū)崿F(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移實時監(jiān)測,。
光遺傳調(diào)控:Cre依賴型KI小鼠結(jié)合光遺傳學(xué)精準(zhǔn)操控神經(jīng)回路。
4. 技術(shù)優(yōu)勢與局限性
優(yōu)勢
精準(zhǔn)性:靶向位點整合避免轉(zhuǎn)基因隨機(jī)插入的不可控性,。
生理相關(guān)性:人源化模型保留內(nèi)源調(diào)控機(jī)制(如啟動子控制),。
多功能拓展:支持條件性誘導(dǎo)(CreERT2)、雙報告基因標(biāo)記等復(fù)合設(shè)計,。
局限性
技術(shù)復(fù)雜度:大片段插入(>20kb)需多輪靶向,,失敗率高。
物種差異殘留:人源化模型仍受小鼠微環(huán)境影響(如細(xì)胞因子不匹配),。
成本與周期:CRISPR加速流程但定制模型仍需4-12個月,。