蛋白質(zhì)分子量測(cè)定：關(guān)鍵技術(shù),、未來(lái)前景檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì分子量測(cè)定廣泛應(yīng)用于dànbáizhì結(jié)構(gòu)解析,、功能研究、藥物開(kāi)發(fā),、疾病診斷等領(lǐng)域,。準(zhǔn)確的分子量測(cè)定不僅有助于理解dànbáizhì的結(jié)構(gòu)和功能，還能用于鑒定dànbáizhì的修飾狀態(tài),、聚集行為和復(fù)合物組成,。目前，已開(kāi)發(fā)出多種測(cè)定dànbáizhì分子量的方法,，包括凝膠電泳,、質(zhì)譜分析、超速離心,、凝膠過(guò)濾色譜,、光散射技術(shù)和核磁共振等。不同方法各有優(yōu)劣，適用于不同類型的dànbáizhì及實(shí)驗(yàn)需求,。百泰派克生物科技在本文為您系統(tǒng)地介紹這些技術(shù)的概述，探討其局限性,，并展望未來(lái)發(fā)展趨勢(shì),。

一、dànbáizhì分子量測(cè)定的關(guān)鍵技術(shù)

1,、SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）

（1）原理

SDS-PAGE 是基于dànbáizhì在SDS（十二烷基硫酸鈉）變性作用下的電泳遷移率差異進(jìn)行分子量測(cè)定的方法,。SDS使dànbáizhì帶上均一的負(fù)電荷，使分子量成為影響遷移速率的主要因素,。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 簡(jiǎn)便快捷,，實(shí)驗(yàn)設(shè)備要求低。

• 廣泛適用,，適用于大多數(shù)dànbáizhì的分子量估算,。

• 可同時(shí)分析多個(gè)樣品，成本較低,。

（3）局限性

* 精度較低,，只能提供分子量的相對(duì)估計(jì)。

• 不能區(qū)分具有相同分子量但不同構(gòu)象的蛋白,。

• 對(duì)糖蛋白等特殊dànbáizhì可能產(chǎn)生誤導(dǎo)性結(jié)果,。

2、質(zhì)譜分析（Mass Spectrometry, MS）

（1）原理

質(zhì)譜技術(shù)利用離子化的方法將dànbáizhì分子解離成帶電粒子,，并通過(guò)質(zhì)荷比（m/z） 進(jìn)行分離和檢測(cè),，以測(cè)定dànbáizhì的分子量。常見(jiàn)的離子化方法包括基質(zhì)輔助激光解吸/電離（MALDI） 和電噴霧離子化（ESI）,。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 高精度,，可達(dá)到±0.01% 以內(nèi)的誤差。

• 適用于dànbáizhì修飾研究,，如磷酸化,、乙酰化等翻譯后修飾,。

• 檢測(cè)靈敏度高,，適用于低濃度樣品。

（3）局限性

* 樣品需要純化,，雜質(zhì)可能干擾檢測(cè),。

• 大型復(fù)合蛋白難以直接分析，需要額外的解離策略,。

• 需要昂貴儀器,，實(shí)驗(yàn)成本高。

3、超速離心分析（Analytical Ultracentrifugation, AUC）

（1）原理

AUC 通過(guò)高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力測(cè)量dànbáizhì在溶液中的沉降行為,，從而推算分子量,。主要有沉降速率法（SV） 和沉降平衡法（SE） 兩種模式。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 可測(cè)量天然狀態(tài)下的dànbáizhì分子量,，不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

• 可用于研究dànbáizhì聚集狀態(tài) 和 寡聚化程度。

• 可用于測(cè)定蛋白復(fù)合體的真實(shí)分子量,。

（3）局限性

* 實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng),，通常需12-48小時(shí)。

• 數(shù)據(jù)分析復(fù)雜,，需要zhuānyè軟件（如 SEDFIT）,。

• 儀器昂貴，操作需要zhuānyè培訓(xùn),。

4,、凝膠過(guò)濾色譜（Size Exclusion Chromatography, SEC）

（1）原理

SEC 基于dànbáizhì分子在凝膠顆粒間的不同擴(kuò)散行為進(jìn)行分離，大分子較快通過(guò)柱子,，小分子則滯留時(shí)間較長(zhǎng),。dànbáizhì的洗脫體積與其分子量相關(guān)。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 非變性方法,，可測(cè)定dànbáizhì的天然構(gòu)象和聚集狀態(tài),。

• 可與HPLC或MS聯(lián)用，增強(qiáng)檢測(cè)能力,。

• 樣品回收率高,，適用于dànbáizhì純化。

（3）局限性

* 需要校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品,，誤差較大,。

• 對(duì)非球形蛋白精度較低，如纖維狀蛋白,。

• 樣品濃度要求較高,，低濃度蛋白難以檢測(cè)。

5,、光散射技術(shù)（Multi-Angle Light Scattering, MALS）

（1）原理

MALS 通過(guò)測(cè)量dànbáizhì分子散射的光強(qiáng)度與角度關(guān)系來(lái)計(jì)算其分子量,，常與SEC聯(lián)用（SEC-MALS）。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)品,，直接測(cè)定分子量,。

• 適用于非球形蛋白，不受形狀影響,。

• 可分析dànbáizhì的聚集狀態(tài),。

（3）局限性

* 對(duì)樣品濃度敏感，低濃度蛋白信號(hào)較弱。

• 數(shù)據(jù)處理復(fù)雜,，需要zhuānyè軟件,。

二、dànbáizhì分子量測(cè)定未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)

1,、結(jié)合多種技術(shù)以提高準(zhǔn)確性

未來(lái)的dànbáizhì分子量測(cè)定可能更多地依賴多種技術(shù)的結(jié)合,，例如SEC-MALS-MS（將凝膠過(guò)濾、光散射和質(zhì)譜結(jié)合）可實(shí)現(xiàn)更jīngzhǔn的分子量測(cè)定,。

2、發(fā)展新型高通量測(cè)定方法

隨著生物醫(yī)藥研究的發(fā)展,，高通量蛋白分析技術(shù)（如微流控芯片,、單分子技術(shù)）將成為趨勢(shì)，提高測(cè)定效率和數(shù)據(jù)可靠性,。

3,、AI與機(jī)器學(xué)習(xí)輔助數(shù)據(jù)分析

人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)可用于優(yōu)化dànbáizhì分子量數(shù)據(jù)分析，提高模型擬合精度,，降低實(shí)驗(yàn)誤差,。

4、開(kāi)發(fā)更高靈敏度的新型檢測(cè)技術(shù)

如超高分辨率質(zhì)譜（HRMS）和低濃度蛋白分析技術(shù)的發(fā)展,，使得更復(fù)雜的dànbáizhì樣本也能得到準(zhǔn)確的分子量測(cè)定,。

dànbáizhì分子量測(cè)定的各種技術(shù)在精度、適用性和局限性方面有所不同,。未來(lái)的發(fā)展方向?qū)⒅赜谔岣呔?、自?dòng)化檢測(cè)、高通量分析及數(shù)據(jù)智能化,。在dànbáizhì分子量測(cè)定領(lǐng)域,，百泰派克生物科技致力于提供前沿的技術(shù)支持和服務(wù)。我們憑借優(yōu)良的實(shí)驗(yàn)設(shè)施和zhuānyè的研究團(tuán)隊(duì),，為客戶提供jīngzhǔn,、高效的dànbáizhì分析解決方案。期待與您的合作,。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一,、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù),，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù),。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學(xué),、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué),、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù),。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,，適用于分析組織、細(xì)胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題,。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白,。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右,，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq,。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率,、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等,。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別,。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo),。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì,、多肽,、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù),。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA,、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查,，軟件審計(jì)追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā),、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù),；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué),、代謝組學(xué)、生物藥物表征,、單細(xì)胞分析,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái),，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

蛋白質(zhì)分子量測(cè)定：關(guān)鍵技術(shù)、未來(lái)前景檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹