P68546 pCMV-3×FLAG-Atg7(rat)-Neo
- 公司名稱 上海禾午生物科技有限公司
- 品牌 禾午生物
- 型號 P68546
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/5/23 21:01:54
- 訪問次數(shù) 33
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供貨周期 | 兩周 | 規(guī)格 | 瓶 |
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貨號 | P68546 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
主要用途 | 僅供科研 |
名稱 | pCMV-3×FLAG-Atg7(rat)-Neo |
別稱 | NM_001012097.1;Apg7l |
基因長 | 2097bp |
質(zhì)粒宿主 | 哺乳細(xì)胞 |
質(zhì)粒用途 | 蛋白表達(dá) |
片段類型 | ORF |
片段物種 | 大鼠 |
原核抗性 | Amp |
篩選標(biāo)記 | Neo/G418 |
啟動子 | CMV |
復(fù)制子 | pUC |
感受態(tài) | DH5a |
溫度 | 37度 |
背景載體 | pCMV-T7-3×FLAG-MCS-Neo |
正向引物 | CMV-F |
注意事項:轉(zhuǎn)化前請準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱,、抗生素使用濃度,、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1,、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min,;
2,、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,,并做好標(biāo)記,;
3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,,冰浴30min,;
4、42℃熱激90s,,再冰浴2min,;
5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,,180rpm震蕩培養(yǎng)45min,;
6、6000rpm離心5min,,僅留100ul上清混勻菌體沉淀,;
7、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上,,倒入適量玻璃珠,,涂勻液體;
8,、將平板正向培養(yǎng)1h,,再倒置培養(yǎng)12h~16h;
9,、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒