P68503 pCMV-Enpp1(mouse)-Puro
- 公司名稱(chēng) 上海禾午生物科技有限公司
- 品牌 禾午生物
- 型號(hào) P68503
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/5/23 20:33:19
- 訪問(wèn)次數(shù) 12
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供貨周期 | 兩周 | 規(guī)格 | 瓶 |
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貨號(hào) | P68503 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
主要用途 | 僅供科研 |
名稱(chēng) | pCMV-Enpp1(mouse)-Puro |
別稱(chēng) | NM_001308327.1;4833416E15Rik; CD203c; E-NPP 1; E-NPP1;Ly-41; M6S1; NPP1; Npps; PC-1; Pca; Pca-1; Pdnp1; ttw;twy; |
基因長(zhǎng) | 2721bp |
質(zhì)粒宿主 | 哺乳細(xì)胞 |
質(zhì)粒用途 | 蛋白表達(dá) |
片段類(lèi)型 | ORF |
片段物種 | 小鼠 |
原核抗性 | Amp |
篩選標(biāo)記 | Puro |
啟動(dòng)子 | CMV |
復(fù)制子 | pUC |
感受態(tài) | DH5a |
溫度 | 37度 |
背景載體 | pCDNA3.1-CMV-MCS-SV40-Puro |
正向引物 | CMV-F |
注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱(chēng),、抗生素使用濃度,、感受態(tài)名稱(chēng)和培養(yǎng)溫度。
1,、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,,再加入20μl~50μl無(wú)菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來(lái)溶解質(zhì)粒,室溫放置1min,;
2,、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),,置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記,;
3,、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min,;
4,、42℃熱激90s,再冰浴2min,;
5,、加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min,;
6,、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀,;
7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,,倒入適量玻璃珠,,涂勻液體;
8,、將平板正向培養(yǎng)1h,,再倒置培養(yǎng)12h~16h;
9,、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒