P68238 pCMV-EGFP-Nnt(rat)-3×Myc-Neo
- 公司名稱 上海禾午生物科技有限公司
- 品牌 禾午生物
- 型號 P68238
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/5/21 19:48:34
- 訪問次數(shù) 13
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供貨周期 | 兩周 | 規(guī)格 | 瓶 |
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貨號 | P68238 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
主要用途 | 僅供科研 |
名稱 | pCMV-EGFP-Nnt(rat)-3×Myc-Neo |
別稱 | NM_001013157.1; |
基因長 | 3258bp |
質粒宿主 | 哺乳細胞 |
質粒用途 | 蛋白表達 |
片段類型 | ORF |
片段物種 | 大鼠 |
原核抗性 | Amp |
篩選標記 | Neo/G418 |
熒光標記 | 綠色 |
啟動子 | CMV |
復制子 | pUC |
感受態(tài) | DH5a |
溫度 | 37度 |
背景載體 | pCMV-EGFP-MCS-3×Myc-Neo |
正向引物 | pEGFP-C-5' |
注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度,、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度,。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質粒,,室溫放置1min;
2,、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài),,置于冰盒上解凍,并做好標記,;
3,、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min,;
4,、42℃熱激90s,,再冰浴2min;
5,、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;
6,、6000rpm離心5min,,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;
7,、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,,倒入適量玻璃珠,涂勻液體,;
8,、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h,;
9,、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,,根據(jù)實驗需要提取質粒