注意事項(xiàng)：轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱,、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度,。

1,、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min，再加入20μl~50μl無(wú)菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來(lái)溶解質(zhì)粒,，室溫放置1min,；

2、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),，置于冰盒上解凍,，并做好標(biāo)記；

3,、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,，冰浴30min,；

4、42℃熱激90s,，再冰浴2min,；

5、加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基,，180rpm震蕩培養(yǎng)45min,；

6、6000rpm離心5min,，僅留100ul上清混勻菌體沉淀,；

7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,，倒入適量玻璃珠，涂勻液體,；

8,、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h,；

9,、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h,，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒