BT6007 果膠酶（pectinase）試劑盒 果膠系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BT6007
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/5/5 8:15:32
- 訪問次數(shù) 51
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BT6007 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 主要用于食品,、釀酒,、環(huán)保、醫(yī)藥,、紡織及日化用品行業(yè),。 |
果膠酶（pectinase）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：
果膠酶（pectinase）是一類分解果膠質(zhì)酶類的總稱，包括原果膠酶,，果膠酯酶,，多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類，廣泛存在于植物果實(shí)和微生物中,，主要用于食品,、釀酒、環(huán)保,、醫(yī)藥,、紡織及日化用品行業(yè)。
測定原理：
果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸,，具有還原性醛基,，與 DNS 試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì)，在 540nm 有特征吸收峰,，測定 540nm 處吸光值變化可計(jì)算得果膠酶活性
果膠酶（pectinase）試劑盒 果膠系列
試劑組成和配制：
產(chǎn)品名稱 | BT6007-50T/24S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 30ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 2 瓶 | 4℃ |
試劑三：液體 | 30ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 | |
試劑二：粉劑×2 瓶,，4℃保存,；臨用前加入 12.5ml 試劑一，50℃加熱溶解,，用不完的試劑 4℃保存一周。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
自備儀器和用品：
天平,、低溫離心機(jī),、可見分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿,、恒溫水浴鍋,。
酶液提取：
1,、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿,。10000g 4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測,。
2,、細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1ml 提取液）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w,，超聲 3 秒，間隔 7 秒,，總時(shí)間 3min）,；然后 10000g， 4℃離心 10min,，取上清置于冰上待測,。
3、細(xì)胞培養(yǎng)液等：直接檢測,。
測定步驟：
對(duì)照管 | 測定管 | |||
試劑二（µl） | 400 | 400 |
50℃水浴溫育 5min
樣本（µl） | 100 | |
煮沸樣本（µl） | 100 |
混勻,，50℃水浴反應(yīng) 30min
試劑三（µl） | 500 | 500 |
沸水浴 5min，冰浴冷卻終止反應(yīng),，8000g,，4℃，離心 10min,，取上清,，蒸餾水調(diào)零，1ml 玻璃比色皿測定 540nm 處吸光值A,，△A=A 測定管-A 對(duì)照管,。每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,。
注意事項(xiàng)：
1、試劑二若有沉淀析出,，請(qǐng)置于 50℃加熱溶解,。
2、測定之前請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),，如果吸光值較高或較低,，請(qǐng)用提取液做適當(dāng)?shù)南♂尰蛘呒哟髽颖玖浚⒃谟?jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)或者以實(shí)際加入的樣本體積參與計(jì)算,。
3,、煮沸樣本建議在沸水中煮沸 10 分鐘，以將酶che底滅活,。
酶活性計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 3.9642x - 0.008,；R2 = 0.9996；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,，mg/ml,；y 為吸光值。
1. 按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義：在 50℃,，pH3.5 條件下,，每毫克蛋白每小時(shí)分解果膠產(chǎn)生 1mg 半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。
果膠酶活性（mg/h/mg prot）= (ΔA+0.008) ÷3.9642×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T
= 2.523×(ΔA+0.008)÷Cpr
2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義：在 50℃,，pH3.5 條件下,，每克樣本每小時(shí)分解果膠產(chǎn)生 1mg 半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。
果膠酶活性（mg/h /g 鮮重）=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V 反總÷（V 樣×W÷V 樣總）÷T
= 2.523×(ΔA+0.008)÷W
3. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活性定義：在 50℃,，pH3.5 條件下,，每 104 細(xì)胞每小時(shí)分解果膠產(chǎn)生 1mg 半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。
果膠酶活性（mg/h /104cell）=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V 反總÷（V 樣×細(xì)胞數(shù)量÷V 樣總）÷T
= 2.523×(ΔA+0.008)÷細(xì)胞數(shù)量
4. 細(xì)胞培養(yǎng)液
酶活性定義：在 50℃,，pH3.5 條件下,，每毫升培養(yǎng)液每小時(shí)分解果膠產(chǎn)生 1mg 半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。
果膠酶活性（mg/h /ml）=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V 反總÷V 樣÷T=2.523×(ΔA+0.008)
V 反總：反應(yīng)總體積,，0.5ml,；V 樣：反應(yīng)中樣本體積，0.1ml,；V 樣總：加入提取液體積,，1ml；Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/ml,；W，樣本質(zhì)量,，g,；T：反應(yīng)時(shí)間,，0.5h。
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