BC6014 單寧酶（Tannase，TAN）試劑盒 氧化系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BC6014
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/4/3 16:37:41
- 訪問次數(shù) 54
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BC6014 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 單寧酶（Tannase,TAN）試劑盒 |
單寧酶（Tannase,，TAN）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase，EC 3.1.1.20),，它可以水解沒食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,，生成沒食子酸和葡萄糖。
測定原理：
使用抗氧化劑沒食子酸丙酯（PG）作為單寧酶酶促反應的底物,，在 270nn 下測定底物PG 反應前后的光密度變化,計算單寧酶酶活力,。
單寧酶（Tannase，TAN）試劑盒 氧化系列
試劑的組成和配制：
產(chǎn)品名稱 | BC6014-50T/24S | Storage |
試劑一：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 1 支 | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
試劑二：粉劑×1 支,，4℃保存,；臨用前每支加入 3ml 試劑一，充分溶解后備用,；用不完的試劑 4℃保存,；
自備儀器和用品：
紫外分光光度計、水浴鍋,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、1 ml 石英比色皿,、研缽,、冰、蒸餾水
粗酶液提?。?/span>
按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1ml 試劑一），進行冰浴勻漿,。10000g 4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測,。
測定步驟：
1,、分光光度計預熱 30min 以上,，調(diào)節(jié)波長至 270nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、加樣表
試劑名稱（μl） | 對照管 | 測定管 |
95℃水浴 5min 后滅活的粗 酶液 | 50 | |
粗酶液 | 50 |
混勻，40℃準確保溫 10 min 后,，置 95℃水浴中 10 min（蓋緊,，防止水分散失），冷卻
試劑一 | 900 | 900 |
混勻,，270nm 處讀取各管吸光值,。計算ΔA=A 對照-A 測定。每個測定管需設個一個對照管,。
注意事項：
可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,，然后集中進行 5min 95℃沸水浴處理。
TAN 活力單位的計算：
標準條件下測定回歸方程為 y = 0.0058x + 0.0044,，R2 = 0.9994,；x 為PG 含量（µmol/L），y 為吸光值,。
1,、按樣本體積計算
單位的定義：40℃下每毫升粗酶液每分鐘水解減少 0.01µmol 底物PG 所需要的酶量定義為一個酶活單位。
TAN 活性(µmol/min/ml)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V 反總÷0.01÷V 樣÷T
=34.48×( ΔA-0.0044）
2,、按照蛋白濃度計算
單位的定義：40℃下每毫克蛋白每分鐘水解減少 0.01µmol 底物PG 所需要的酶量定義為一個酶活單位(U),。
TAN 活性((µmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V 反總÷0.01÷(V 樣×Cpr)÷T
=34.48×(ΔA-0.0044）÷Cpr
3、按照樣本鮮重計算
單位的定義：40℃下每克樣品每分鐘水解減少 0.01µmol 底物PG 所需要的酶量定義為一個酶活單位(U),。
TAN 活性(µmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V 反總÷0.01÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=34.48×(ΔA-0.0044）÷W
V 反總：反應體系總體積,，1ml； V 樣：加入樣本體積,，0.05ml,；V 樣總：加入提取液體積，1 ml,；T：反應時間,，10min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/ml,；W：樣本質(zhì)量，g,。
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