BI6049 酸性木聚糖酶測定試劑盒 糖代謝
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BI6049
- 產地 北京
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/1 15:31:28
- 訪問次數 33
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| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BI6049 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶 |
酸性木聚糖酶（Acidic Xylanase，ACX）測定試劑盒說明書
微量法 100 管/48 樣
酸性木聚糖酶測定試劑盒 糖代謝
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生,，能催化水解木聚糖,，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細胞壁以及β-葡聚糖,，降低釀造中物料的粘度,，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖,，促進營養(yǎng)物質的吸收利用,，因而廣泛的應用于釀造和飼料工業(yè)中，ACX 一般分離自耐酸的真菌,，細菌及部分霉菌,。
測定原理：
ACX 在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進一步在沸水浴條件下與 3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應,，在 540nm 處有特征吸收峰,，反應液顏色的深淺與酶解產生的還原糖量成正比，通過測定反應液在 540nm 吸光值增加速率,，可計算ACX 活力,。
組成：
產品名稱 | BI6049-100T/48S | Storage |
緩沖液：液體 | 90ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 10ml | 4℃避光 |
試劑二：液體 | 10ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 | |
試劑一：液體 10ml×1 瓶，4℃避光保存,。（若出現白色絮狀或顆粒狀沉淀,，可 60℃加熱溶解后使用）。
自備儀器和用品：
天平,、低溫離心機,、恒溫水浴鍋，可見分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水,。
粗酶提取：
發(fā)酵液：發(fā)酵液于 8000g,，4℃,，離心 15min，取上清,，作為待測樣品,。
酶干粉：稱約 0.1mg，加 1ml 緩沖液溶解待測,。
組織樣本：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1ml緩沖液）進行冰浴勻漿,，然后 8000g，4℃,，離心 10min,，取上清待測。
測定操作表：
1,、分光光度計/酶標儀預熱 30min,，調節(jié)波長至 540nm。
2,、操作表
對照管 | 測定管 | |
樣品（μl） | 60 | |
滅活的樣品（μl） （95℃水浴 15min） | 60 | |
緩沖液（μl） | 90 | 90 |
試劑一（μl） | 60 | 60 |
混勻,，50℃水浴中反應 30min，立即沸水浴中 10min 滅活,。(注意不要讓蓋子爆開,，以免 進水，改變了反應體系) | ||
試劑二（μl） | 90 | 90 |
混勻,，沸水浴顯色 5min,，取 200µL 于微量石英比色皿/96 孔板中 540nm 處測定吸光值A， 計算ΔA=A 測定管-A 對照管,。每個測定管設一個對照管,。 | ||
ACX 計算公式：
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 2.5554x - 0.002 ,，R2 = 0.9983
按液體體積活力計算：
酶活定義：50℃,，pH4.8 條件下，每毫升液體樣本每分鐘分解木聚糖產生 1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位,。
ACX 活力（nmol/min/ml）= （ΔA+0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋倍數×106
= 435× (ΔA+0.002)
按蛋白濃度計算：
酶活定義：50℃,，pH4.8 條件下，每毫克蛋白每分鐘分解木聚糖產生 1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位,。
ACX 活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋倍數×106÷Cpr
= 435×(ΔA +0.002 ) ÷Cpr
按鮮重計算：
酶活定義：50℃,，pH4.8 條件下，每克樣本每分鐘分解木聚糖產生 1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位,。
ACX 活力（nmol/min/g 鮮重）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋倍數×106÷W
= 435×(ΔA +0.002 ) ÷W
150：木糖的分子量,；T：反應時間，30min,；稀釋倍數=V 反總÷V 樣=300µL÷60µL=5,；
106：轉化因子，即 1mg/ml=106ng/ml,；Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/ml；W：樣本質量,，g,。
用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 1.2777x - 0.002 ,，R2 = 0.9983
按液體體積活力計算：
酶活定義：50℃，pH4.8 條件下,，每毫升液體樣本每分鐘分解木聚糖產生 1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位,。
ACX 活力（nmol/min/ml）= （ΔA+0.002）÷1.2777÷150÷T×稀釋倍數×106
= 869.6× (ΔA+0.002)
按蛋白濃度計算：
酶活定義：50℃，pH4.8 條件下,，每毫克蛋白每分鐘分解木聚糖產生 1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位,。
ACX 活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.002）÷1.2777÷150÷T×稀釋倍數×106÷Cpr
= 869.6×(ΔA +0.002 ) ÷Cpr
按鮮重計算：
酶活定義：50℃，pH4.8 條件下,，每克樣本每分鐘分解木聚糖產生 1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位,。
ACX 活力（nmol/min/g 鮮重）= （ΔA +0.002）÷1.2777÷150÷T×稀釋倍數×106÷W
= 869.6×(ΔA +0.002 ) ÷W
150：木糖的分子量；T：反應時間,，30min,；稀釋倍數=V 反總÷V 樣=300µL÷60µL=5；
106：轉化因子,，即 1mg/ml=106ng/ml,；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml,；W：樣本質量,，g。
注意事項：
吸光度變化應該控制在 0.01～0.8 之間,，否則加大樣品量或稀釋樣品,，注意計算公式中參與計算的稀釋倍數要相應改變。
試劑盒 2-8℃保存,，保質期 3 個月,，建議盡快使用。
酸性木聚糖酶測定試劑盒 糖代謝
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