人原代DC細胞專用培養(yǎng)基

人原代DC細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代DC細胞最佳的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含人原代DC細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于人原代DC細胞的培養(yǎng),。

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白(抗原)

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 標簽)

MDGA2重組小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

LRP10重組人 LRP10 蛋白 Protein

小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒

Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人3(VD3)試劑盒

HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗體(AOAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancholecystokinin,CCK試劑盒人膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒規(guī)格：96T/48T

紫外可見光分析20樣本

HumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素(Secretin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人組織多肽抗原(TPA)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白去乙?；?/span>(HD)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白酶抗體(CathAb)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白酶S(cath-S)試劑盒   96T/48T

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 ,，英文名： MMP-9 ELISA Kit

Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒

MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子6

細菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

EPB41L5蛋白抗體

過氧化氫酶重組鼠單克隆抗體

人原代DC細胞專用培養(yǎng)基MDGA2重組小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein

BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白(抗原)

LRP10重組人 LRP10 蛋白 Protein

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 標簽)

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。