大鼠原代呼吸道上皮細胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持      大鼠     原代呼吸道上皮細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含      大鼠     原代呼吸道上皮細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于      大鼠     原代呼吸道上皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)

CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白

CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標簽)

MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein

豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒

People of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 兔型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAP13(Humanapelin13)ELISAKit人apelin13

血清樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒20次

PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit豬白介素18(IL-18)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠心素(mouse ANP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠凋亡誘導因子(mouse AIF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠固(mouse ALD)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒

HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit 人脂氧素A4(LXA4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1試劑盒雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞DAPKINASE蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit小鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

雄激素受體抗體

N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶11抗體

大鼠原代呼吸道上皮細胞專用培養(yǎng)基CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標簽) Protein

多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)

MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein

CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白

TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標簽)

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌,、真菌等污染檢測。