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大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元(原代)

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       上海富雨生物科技有限公司是一家集研發(fā),、銷售,、技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè)銷售和自產(chǎn)多種醫(yī)學(xué)科研用試劑 , 專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)企業(yè),專業(yè)從事科研機構(gòu)及生產(chǎn)企業(yè)所需要的科研試劑,、耗材,、儀器以及技術(shù)服務(wù)。

       產(chǎn)品涉及分子生物學(xué),、細胞生物學(xué),、遺傳學(xué)、免疫學(xué),、生物化學(xué),、蛋白質(zhì)學(xué)等相關(guān)產(chǎn)品。 自研產(chǎn)品和合作研發(fā)產(chǎn)品主要有原代細胞,、細胞株,、ELSIA試劑盒、蛋白,、抗體,、感受態(tài)細胞和分子類試劑盒。

原代細胞,、細胞株,、ELSIA試劑盒、蛋白,、抗體、感受態(tài)細胞和分子類試劑盒

一,、大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞簡介:
神經(jīng)元,,又稱神經(jīng)細胞,是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細胞,,它由細胞體和細胞突起構(gòu)成。細胞體位于腦,、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中,。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分,,又可分為樹突和軸突,。每個神經(jīng)元可以有一或多個樹突,可以接受刺激并將興奮傳入細胞體,。每個神經(jīng)元只有一個軸突,,可以把興奮從胞體傳送到另一個神經(jīng)元或其他組織,如肌肉或腺體,。
本公司生產(chǎn)的大鼠神經(jīng)元采用酶解法制備而來,,細胞總量約為5×105/T25方瓶,,MAP2、Tubulin呈陽性,,細胞純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
二、 使用方法

1 ,、您收到細胞后,,請按照以下方法進行操作:

取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,,拆下封口膜,,放入 37 , 5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中靜置 2-3 小時, 以穩(wěn)定細胞狀態(tài),,然后打開瓶子回收瓶子中培養(yǎng)液作為后續(xù)培養(yǎng)此細胞的培養(yǎng)液(備注: 先使用瓶子中培養(yǎng)液培養(yǎng)及盡快凍存保種細胞,, 保存種子后再嘗試自己完全培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察是否適合此細胞生長,以免使用自己培養(yǎng)液不適合細胞生長造成細胞狀態(tài)不好或死亡 ,,最后按照后面細胞傳代步驟進行細胞傳代培養(yǎng),。
2 、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 90%面積時,,棄 T25 方瓶中的培養(yǎng)液,, PBS 清洗細胞 3 次;
2)添加 0.25%消化液約 2ml 至培養(yǎng)瓶中 37 度培養(yǎng)箱放置 3-5 分鐘,,倒置顯微鏡下觀察,,待細胞基本脫落后加入培養(yǎng)基終止消化,用滴管混勻并將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,,1000rpm/min,,離心 5min
3)棄上清,,沉淀細胞用 10ml 培養(yǎng)基重懸,,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代, 最后放入 37 ,5%CO2 胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4)待細胞貼壁后,, 觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代,。
3 ,、細胞凍存
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 90%面積時,,棄 T25 方瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞 3 次,;
2)添加 0.25%消化液約 2ml 至培養(yǎng)瓶中 37 度培養(yǎng)箱放置 3-5 分鐘,,倒置顯微鏡下觀察,待細胞基本脫落后加入培養(yǎng)基終止消化,,用滴管混勻并將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,,1000rpm/min,離心 5min,;
3)用適當(dāng)量的凍存液(培養(yǎng)液: FBSDMSO=7:2:1)重懸細胞,,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20 1h,,然后將其移入-80℃過夜,, 24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期儲存(或者按照梯度程序降溫模式直接放置-80 度凍存后并轉(zhuǎn)移液氮中長期儲存)。
4,、細胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具 ,,快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁,;
2)將凍存管中的細胞轉(zhuǎn)移至含 5ml 培養(yǎng)液無菌離心管中,1000rpm 離心 5min ,,然后加入 5ml 全培養(yǎng)液混勻細胞,, 將細胞懸液轉(zhuǎn)移至 T25 培養(yǎng)瓶中, 放置于 37 , 5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
3
第二天,,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

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兔子
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