小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞（原代）
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海富雨生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/12 13:40:16
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一、小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞簡(jiǎn)介
平滑肌即無(wú)紋肌的通稱(chēng),，平滑肌是由長(zhǎng)紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成,。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官，而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素（肌層）,。平滑肌細(xì)胞互相連接,，形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官；在功能上可以通過(guò)縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動(dòng)和變形,，也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮,，使器官對(duì)抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀。支氣管平滑肌細(xì)胞的收縮,、舒張,、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過(guò)程有關(guān)．如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等,。例如在哮喘發(fā)病時(shí),，可以檢測(cè)到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大，表型也發(fā)生改變,，由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型,，并分泌多種與細(xì)胞因子；而且出現(xiàn)向氣管腔遷移的跡象,。本公司生產(chǎn)的小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞采用酶解法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×105/T25方瓶,，細(xì)胞純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
二,、 使用方法
1 、您收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出 T25 方瓶,， 75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜,，放入 37℃ , 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置 2-3 小時(shí),， 以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后打開(kāi)瓶子回收瓶子中培養(yǎng)液作為后續(xù)培養(yǎng)此細(xì)胞的培養(yǎng)液（備注： 先使用瓶子中培養(yǎng)液培養(yǎng)及盡快凍存保種細(xì)胞,， 保存種子后再?lài)L試自己完全培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察是否適合此細(xì)胞生長(zhǎng),，以免使用自己培養(yǎng)液不適合細(xì)胞生長(zhǎng)造成細(xì)胞狀態(tài)不好或死亡） ，最后按照后面細(xì)胞傳代步驟進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
2 ,、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 90%面積時(shí)，棄 T25 方瓶中的培養(yǎng)液,， 用 PBS 清洗細(xì)胞 3 次,；
2）添加 0.25%消化液約 2ml 至培養(yǎng)瓶中 37 度培養(yǎng)箱放置 3-5 分鐘，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞基本脫落后加入培養(yǎng)基終止消化,，用滴管混勻并將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm/min,，離心 5min,；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用 10ml 培養(yǎng)基重懸,，然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,， 最后放入 37℃ ,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后,， 觀察培養(yǎng)結(jié)果,，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3 ,、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 90%面積時(shí),，棄 T25 方瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細(xì)胞 3 次；
2）添加 0.25%消化液約 2ml 至培養(yǎng)瓶中 37 度培養(yǎng)箱放置 3-5 分鐘,，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞基本脫落后加入培養(yǎng)基終止消化，用滴管混勻并將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,，1000rpm/min,，離心 5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（培養(yǎng)液： FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞,，并放置于凍存管中,；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1h，然后將其移入-80℃過(guò)夜,， 24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存（或者按照梯度程序降溫模式直接放置-80 度凍存后并轉(zhuǎn)移液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存）,。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具） ,，快速將其置入 37℃水浴中解凍,， 直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁,；
3）第二天,，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
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