小鼠脂肪細胞（原代）
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 上海富雨生物科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/2/11 18:14:59
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一,、小鼠脂肪細胞簡介
脂肪細胞常呈白色,，在幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達到,，此后數(shù)量一般不再增加,。細胞內含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質泡,，富含光面內質網(wǎng),。此外,，還有一種褐色脂肪細胞，在體內主要存在于肩胛骨間,、頸背部,、腋窩、縱隔及腎臟周圍,，含有高度團縮的褐色脂肪,，作用是將脂質分解產熱，調節(jié)體內脂質比例,。本公司生產的小鼠脂肪細胞采用酶解法制備而來,，細胞總量約為5×105/T25方瓶，細胞純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
二,、 使用方法
1 、您收到細胞后,，請按照以下方法進行操作：
取出 T25 方瓶,， 75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜,，放入 37℃ , 5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中靜置 2-3 小時,， 以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后打開瓶子回收瓶子中培養(yǎng)液作為后續(xù)培養(yǎng)此細胞的培養(yǎng)液（備注： 先使用瓶子中培養(yǎng)液培養(yǎng)及盡快凍存保種細胞,， 保存種子后再嘗試自己完全培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察是否適合此細胞生長,，以免使用自己培養(yǎng)液不適合細胞生長造成細胞狀態(tài)不好或死亡） ，最后按照后面細胞傳代步驟進行細胞傳代培養(yǎng),。
2 ,、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 90%面積時，棄 T25 方瓶中的培養(yǎng)液,， 用 PBS 清洗細胞 3 次,；
2）添加 0.25%消化液約 2ml 至培養(yǎng)瓶中 37 度培養(yǎng)箱放置 3-5 分鐘，倒置顯微鏡下觀察,，待細胞基本脫落后加入培養(yǎng)基終止消化,，用滴管混勻并將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm/min，離心 5min,；
3）棄上清,，沉淀細胞用 10ml 培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,， 最后放入 37℃ ,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4）待細胞貼壁后,， 觀察培養(yǎng)結果,，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3 ,、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 90%面積時,，棄 T25 方瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細胞 3 次,；
2）添加 0.25%消化液約 2ml 至培養(yǎng)瓶中 37 度培養(yǎng)箱放置 3-5 分鐘,，倒置顯微鏡下觀察，待細胞基本脫落后加入培養(yǎng)基終止消化,，用滴管混勻并將懸液轉移至 15ml 離心管中,，1000rpm/min，離心 5min,；
3）用適當量的凍存液（培養(yǎng)液： FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞,，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1h,，然后將其移入-80℃過夜,， 24h 后轉入液氮中進行長期儲存（或者按照梯度程序降溫模式直接放置-80 度凍存后并轉移液氮中長期儲存）。
4,、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具） ,，快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結晶,，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁,；
3）第二天,，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
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