BioShuttle PEI-293貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑用途：用于貼壁細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建,；

BioShuttle PEI-293貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸保存：QuickPEI轉(zhuǎn)染試劑建議常溫運(yùn)輸,；無(wú)菌取用；-20 oC保存,，有效期24個(gè)月,；-80 oC可長(zhǎng)期保存；若冷凍保存,，解凍后于2~8oC保存（可保存6個(gè)月）,，避免反復(fù)凍融，影響轉(zhuǎn)染效果,；

過(guò)濾條件：本產(chǎn)品經(jīng)經(jīng) 0.22µm濾膜過(guò)濾除菌,。

產(chǎn)品描述

QuickPEI轉(zhuǎn)染試劑是一種化合物轉(zhuǎn)染試劑，不含動(dòng)物源性成分,，是一種功能強(qiáng)大的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑,。為貼壁細(xì)胞提供高效且可重復(fù)的基因遞送方案。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中,，QuickPEI在大范圍內(nèi)提供均一的高基因表達(dá)（96孔板至100L生物反應(yīng)器）,。特別適用于自動(dòng)預(yù)制或手動(dòng) HTS（高通量篩選）轉(zhuǎn)化方案,，可用于抗體表達(dá)，各種病毒包裝如AAV,，慢病毒,，腺病毒，及重組蛋白的試劑,。

貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染使用方法（以6孔板為例）:

1. 接種細(xì)胞：為了提高轉(zhuǎn)染效率,，建議轉(zhuǎn)染前24小時(shí)接種細(xì)胞（如293細(xì)胞）到6孔細(xì)胞板中，每孔5~10×105細(xì)胞,，3ml培養(yǎng)基,，轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度在70%~80%為宜。

2. 準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：按照以下體系配制DNA-PEI核酸-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物：

1）對(duì)于每孔細(xì)胞,，使用100 μL無(wú)血清稀釋液（如DMEM等) 稀釋2 μg目的DNA,，充分混勻成DNA稀釋液。

【注】無(wú)血清稀釋液建議采用Opti-MEM,、DMEM或ddH2O,，使用Opti-MEM更佳。

2）立刻向100 μL的DNA稀釋液中加入6 μL的QuickPEI轉(zhuǎn)染試劑,，輕輕混勻,。DNA：PEI（質(zhì)量體積比， µg:µl) 比例可以按需調(diào)整

3）在室溫下孵育10~15 min,，形成DNA-陽(yáng)離子核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物,。

3. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞：

1）在形成復(fù)合物過(guò)程中，移除細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基,，每孔中加入2 mL新鮮預(yù)熱的培養(yǎng)基,。

2）將全部DNA-PEI 復(fù)合物加入到細(xì)胞中，搖動(dòng)培養(yǎng)板,，輕輕混勻,。

3）37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),，轉(zhuǎn)染后最快24 h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)染基因的表達(dá),。請(qǐng)自行確定適合檢測(cè)時(shí)間。

4. 穩(wěn)轉(zhuǎn)篩選（可選）

轉(zhuǎn)染24 h后,，將細(xì)胞傳代至新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中（將細(xì)胞稀釋10倍以上）,，37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱孵育過(guò)夜,。第二天加入與轉(zhuǎn)染抗性基因相匹配的篩選藥物,。約1~2周可篩選到耐藥性克隆，在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。