人腎平滑肌瘤復蘇細胞,；G-402

人腎平滑肌瘤復蘇細胞,；G-402

常溫細胞收貨后處理方法

1. 收到細胞后,，首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶有破裂,，培養(yǎng)基外溢,、渾濁等現(xiàn)象，請及時拍照并與我們聯(lián)系,。

2. 用75%酒精對培養(yǎng)瓶表面進行消毒處理,，將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)2~4 h，以恢復細胞狀態(tài),。

3. 靜置完成后,，取出培養(yǎng)瓶，顯微鏡下觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）前三天照片為重要售后依據(jù),。如發(fā)現(xiàn)細胞異常請及時與我們聯(lián)系，如果細胞簽收三天內未與我們聯(lián)系,，則默認為收貨良好,。

4. 若細胞密度超過80%，則可以根據(jù)提供的細胞培養(yǎng)步驟進行傳代或凍存,；若細胞密度未達到80%,，收集瓶中完quan培養(yǎng)基，留6mL培養(yǎng)基,，放入細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。

凍存細胞收貨后處理方法

1. 收到細胞后，首先觀察泡沫箱中干冰是否有剩余,，凍存管是否完好,，是否有解凍情況，若發(fā)現(xiàn)干冰完quan汽化或凍存管有解凍現(xiàn)象,，請及時拍照并與我們聯(lián)系,。如果細胞簽收三天內未與我們聯(lián)系，則默認為收貨良好,。

2. 復蘇第一管如有活性、狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系,，會有技術人員與您溝通指導后再復蘇第 二管,。

特別說明：未與我方聯(lián)系，擅自復蘇第二管出現(xiàn)問題不予售后。

細胞培養(yǎng)步驟

1. 復蘇細胞：從液氮灌中或-80℃冰箱中查找到需要復蘇的細胞,，水浴鍋提前打開預熱37℃,。

1) 將查找到的凍存細胞在37℃水浴中迅速搖晃解凍；

2) 將凍存管中的細胞移至含 5ml 完quan培養(yǎng)基的離心管中,，1000rpm 離心 5min,；

3) 棄去上清液，補加4-6mL完quan培養(yǎng)基后吹勻,，接種于T25培養(yǎng)瓶中（或6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜，第二天換液并檢查細胞密度,。

2. 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

1) 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次；

2) 加1-2mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化3-5min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后，加5ml以上含10%血清的完quan培養(yǎng)基終止消化,；

3) 輕輕吹打細胞,，完quan脫落后吸出至離心管中，1000rpm離心5-8min,，棄去上清液,，補加1-2mL完quan培養(yǎng)基后吹勻；

4) 按5-6mL/瓶補加完quan培養(yǎng)基,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含5-6 mL完quan培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中,。

（即1個T25傳代接種至2~3個T25或者2~3個直徑為6cm的培養(yǎng)皿）

3. 細胞凍存：細胞收集參照傳代步驟1~2，按凍存數(shù)量加入無血清凍存液后直接放-80℃冰箱過夜,，后續(xù)可轉入液氮罐中長期保存,。

關于細胞株售后服務

一、細胞出現(xiàn)問題,，可重發(fā)的情況有哪些,？判定標準是什么？

1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,，細胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā),；

2. 細胞污染問題,，請在收到產品48小時內，給我們提出真實的實驗結果,，核實后重發(fā),；

3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后,，絕大多數(shù)細胞未存活,，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā),；

4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,，出現(xiàn)污染，重發(fā),；

5. 細胞活性問題,，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,，核實后予重發(fā),；

6. 細胞收到當天以及第2、3天請拍照,，3天未告知的,，視為產品合格。4-7天內出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,，并跟技術人員溝通的,，由技術人員判定為我方責任的，重發(fā),。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā),。

二、細胞出現(xiàn)問題,，不予以重發(fā)的情況有哪些,？

1. 客戶造成細胞污染，不重發(fā),；

2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā)；

3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),；

4. 細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,，不重發(fā),；

5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理的,，不重發(fā)；

6. 細胞收到2天內,，未告知，不重發(fā),；

7. 視具體情況而定,。