人腎平滑肌瘤復(fù)蘇細胞,；G-402

人腎平滑肌瘤復(fù)蘇細胞；G-402

常溫細胞收貨后處理方法

1. 收到細胞后,，首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)基外溢,、渾濁等現(xiàn)象,，請及時拍照并與我們聯(lián)系,。

2. 用75%酒精對培養(yǎng)瓶表面進行消毒處理，將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)2~4 h,，以恢復(fù)細胞狀態(tài),。

3. 靜置完成后，取出培養(yǎng)瓶,，顯微鏡下觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）前三天照片為重要售后依據(jù)。如發(fā)現(xiàn)細胞異常請及時與我們聯(lián)系,，如果細胞簽收三天內(nèi)未與我們聯(lián)系，則默認為收貨良好,。

4. 若細胞密度超過80%,，則可以根據(jù)提供的細胞培養(yǎng)步驟進行傳代或凍存；若細胞密度未達到80%,，收集瓶中培養(yǎng)基,，留6mL培養(yǎng)基，放入細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。

凍存細胞收貨后處理方法

1. 收到細胞后,，首先觀察泡沫箱中干冰是否有剩余，凍存管是否完好,，是否有解凍情況,，若發(fā)現(xiàn)干冰汽化或凍存管有解凍現(xiàn)象，請及時拍照并與我們聯(lián)系,。如果細胞簽收三天內(nèi)未與我們聯(lián)系,，則默認為收貨良好。

2. 復(fù)蘇第一管如有活性,、狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系,，會有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再復(fù)蘇第 二管。

特別說明：未與我方聯(lián)系,，擅自復(fù)蘇第二管出現(xiàn)問題不予售后,。

細胞培養(yǎng)步驟 

1. 復(fù)蘇細胞：從液氮灌中或-80℃冰箱中查找到需要復(fù)蘇的細胞，水浴鍋提前打開預(yù)熱37℃,。

1) 將查找到的凍存細胞在37℃水浴中迅速搖晃解凍,；

2) 將凍存管中的細胞移至含 5ml 培養(yǎng)基的離心管中，1000rpm 離心 5min,；

3) 棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻，接種于T25培養(yǎng)瓶中（或6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,，第二天換液并檢查細胞密度,。

2. 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

1) 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,；

2) 加1-2mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后,，加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,；

3) 輕輕吹打細胞，脫落后吸出至離心管中,，1000rpm離心5-8min,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,；

4) 按5-6mL/瓶補加培養(yǎng)基,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含5-6 mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中。

（即1個T25傳代接種至2~3個T25或者2~3個直徑為6cm的培養(yǎng)皿

3. 細胞凍存：細胞收集參照傳代步驟1~2,，按凍存數(shù)量加入無血清凍存液后直接放-80℃冰箱過夜,，后續(xù)可轉(zhuǎn)入液氮罐中長期保存。

關(guān)于細胞株售后服務(wù)

一,、細胞出現(xiàn)問題,，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么,？

1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,，細胞丟失、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等,，重發(fā)；

2. 細胞污染問題,，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā),；

3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,，干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活,，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片）,，重發(fā),；

4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染,，重發(fā),；

5. 細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,，核實后予重發(fā)；

6. 細胞收到當天以及第2,、3天請拍照,，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格,。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟的,，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責任的,，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā),。

二,、細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些,？

1. 客戶造成細胞污染,，不重發(fā)；

2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),；

3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā),；

4. 細胞狀態(tài)不好,，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā),；

5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,，不重發(fā)；

6. 細胞收到2天內(nèi),，未告知,，不重發(fā)；

7. 視具體情況而定,。