使用POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm色譜柱，參照《中國藥典》高效液相色譜法對(duì)決明子提取物進(jìn)行含量測(cè)定,，檢測(cè)大黃酚,、橙黃決明素，可滿足實(shí)驗(yàn)要求,。

對(duì)照品溶液的制備取大黃酚對(duì)照品,、橙黃決明素對(duì)照品適量，精密稱定,，加無水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液制成每1ml含大黃酚30μg,、橙黃決明素20μg的混合溶液，即得,。

供試品溶液的制備 取本品粉末(過三號(hào)篩)約0.5g,，精密稱定，置具塞錐形瓶中,，精密加入甲醇50ml,，稱定重量，加熱回流2小時(shí),，放冷,，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量,，搖勻,，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml,，蒸干,，加稀/鹽酸30ml,，置水浴中加熱水解1小時(shí)，立即冷卻,，用三氯jia烷振搖提取4次,，每次30ml，合并三氯jia烷液,，回收溶劑至干,，殘?jiān)脽o水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液使溶解，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,，并稀釋至刻度,，搖勻，濾過,，取續(xù)濾液,，即得。

測(cè)定法  分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl,，注入液相色譜儀,，測(cè)定，即得,。

色譜條件

色譜柱：POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm

流動(dòng)相：A 乙腈   B 0.1%磷酸溶液

             B conc. 60%（0-15min）

                60→10%（15-30min）

                 0%（30-40min）

流 速：1 mL/min

柱 溫：25 ℃

波 長(zhǎng)：UV 284nm

進(jìn)樣量：10μL

理論板數(shù)按橙黃決明素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000,。