NE-PER核蛋白-胞漿蛋白分離試劑
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- 公司名稱 賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/1/16 21:01:52
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- Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的核蛋白抽提方法,,用戶只需擁有臺(tái)式微量離心機(jī),、離心管和移液器,進(jìn)行簡(jiǎn)單的分步式細(xì)胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可,。NE-PER 試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分,,交叉污染以及基因組 DNA/mRNA 的干擾均降到了。一旦經(jīng)過脫鹽或稀釋,,分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實(shí)驗(yàn),,如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和拉下實(shí)驗(yàn),。
- 快速-2小時(shí)內(nèi)獲得胞核與胞漿內(nèi)的可溶性蛋白組分,,交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了
- 可靠-超過“萬篇”的文獻(xiàn)出鏡率,廣受科研工作者喜愛
- 通用-培養(yǎng)細(xì)胞或者組織(新鮮樣本)
- 高活性-獲得樣本適合于多種下游應(yīng)用,,包括免疫印跡,、凝膠遷移分析(EMSA)、報(bào)告基因分析以及酶活性分析
- 可擴(kuò)展—兩種規(guī)格試劑盒,,滿足從細(xì)胞和組織中抽提樣本的應(yīng)用需求
- 方便—操作簡(jiǎn)單,,無需超速梯度離心

圖1.獲取的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)組分幾乎無交叉污染。采用NE-PER細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)抽提試劑與其他品牌的細(xì)胞核抽提試劑盒提取 HeLa 細(xì)胞,。使用常用的核蛋白,、胞質(zhì)蛋白和膜蛋白標(biāo)志物的抗體,采用NE-PER 試劑盒所得的細(xì)胞核組分幾乎無胞質(zhì)或膜蛋白污染,。

圖2. 抽提各種組織中蛋白的Western Blot結(jié)果,。使用NE-PER核蛋白和胞漿蛋白抽提試劑,從不同組織中富集和分離核蛋白和胞漿蛋白,,并分別進(jìn)行Western Blot檢測(cè),。
分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多,但大多數(shù)制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時(shí),,并需要機(jī)械勻漿,、凍融循環(huán)、反復(fù)離心或透析,,而這些都可能影響核蛋白的完整性,。NE-PER 核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案,能夠分步裂解細(xì)胞并從胞漿中分離出完整的細(xì)胞核,,然后再?gòu)幕蚪M DNA 與 mRNA 中抽提核蛋白,。這一溫和的過程可在兩小時(shí)之內(nèi)完成,且使用培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)僅需標(biāo)準(zhǔn)的桌臺(tái)式離心機(jī)即可,。此外,,用戶還可以從細(xì)胞培養(yǎng)物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白,。
本試劑盒能夠從兩百萬個(gè)細(xì)胞中提出 200 至 500µg 胞漿蛋白和 100 至 200µg 的核蛋白(濃度為 1mg/mL)。一般情況下,,胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在 10% 左右,。本方法分離得到的主要是細(xì)胞核中的可溶蛋白,而非與染色質(zhì)結(jié)合的蛋白或核膜整聯(lián)蛋白,??赏ㄟ^調(diào)整核抽提試劑(NER)的體積來改變胞核抽提物的蛋白濃度,而不會(huì)對(duì)抽提效率造成顯著影響,。從細(xì)胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調(diào)控研究的關(guān)鍵,,然而現(xiàn)有的許多分離細(xì)胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時(shí),,且需要進(jìn)行機(jī)械勻漿,、凍融循環(huán)、重復(fù)離心或透析等操作,,對(duì)許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響,。NE-PER 試劑盒能夠克服這些問題,通過 EMSA 及其他分析技術(shù)為用戶提供高質(zhì)量的濃縮核蛋白抽提物,。
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