jenabioscience:Taq聚合酶

不含緩沖液的熱穩(wěn)定DNA聚合酶

水生棲熱菌，重組,，大腸桿菌

Jena Bioscience由Max-Planck-Institute of Molecular Physiology(Dortmund)的一組科學(xué)家于1998年成立，利用超過25年的學(xué)術(shù)知識為100多個(gè)國家的研究和行業(yè)客戶開發(fā)創(chuàng)新試劑,。

供一般實(shí)驗(yàn)室使用。

單位定義:一個(gè)單位被定義為使用hering精子DNA作為底物，在70℃下30分鐘內(nèi)催化10納摩爾dNTP結(jié)合成酸不溶性形式所需的酶量,。

運(yùn)輸:凝膠包裝運(yùn)輸

儲存條件:儲存在-20°C
避免冷凍/解凍循環(huán)

保質(zhì)期:12個(gè)月

表單:液體

濃度:5單位/微升

描述:
該聚合酶被推薦用于常規(guī)PCR應(yīng)用(最大4 kb片段長度)或高通量PCR。
這種酶在72℃復(fù)制DNA,，在鎂存在的情況下催化核苷酸聚合成5’→3’方向的雙鏈DNA。它還具有5’→3’聚合依賴性核酸外切酶替換活性,，但缺乏3’→5’核酸外切酶(校對)活性。

內(nèi)容:
不包括反應(yīng)緩沖液和核苷酸。請參考我們的緩沖液&成分和核苷酸部分,。

Taq聚合酶
20 mM Tris-HCl,、100 mM KCl、0.1 mM EDTA,、1 mM DTT,、穩(wěn)定劑、50 % (v/v)甘油,、pH 8.0(25℃)中的5單位/μl Taq DNA聚合酶

檢測設(shè)置:
開始前,，融化所有成分并*底渦旋以確保均勻性。

循環(huán)條件:
快速旋轉(zhuǎn)試管/平板以去除氣泡，并將其放入循環(huán)儀中,。

1)退火溫度取決于所用引物的熔化溫度。
2)延伸時(shí)間取決于待擴(kuò)增片段的長度。建議時(shí)間為1分鐘/kb,。

推薦的緩沖系統(tǒng):
紅寶石緩沖液(#PCR-272)包括密度試劑+追蹤染料，并允許將PCR產(chǎn)物直接裝載到電泳凝膠中,。對于DNA檢測/熒光DNA染色,，我們建議使用新一代染料(例如SYBR DNA Stain，#PCR-273)代替經(jīng)典但高度誘變的溴化乙錠,。,

晶體緩沖液(#PCR-271)推薦用于下游應(yīng)用，如DNA測序,、連接,、限制性消化或需要通過吸光度或熒光激發(fā)分析PCR產(chǎn)物的情況。對于凝膠電泳,，在將PCR加載到凝膠中之前,，添加凝膠加載緩沖液和熒光DNA染色劑(例如，帶有DNA染色劑的凝膠加載緩沖液,，#PCR-274 - #PCR-276),。使用預(yù)染色凝膠或運(yùn)行后染色方案也是可能的。,

KCl緩沖液(#PCR-262)推薦用于常規(guī)PCR反應(yīng),。緩沖液針對最高特異性進(jìn)行了優(yōu)化，但可能需要對檢測參數(shù)(如MgCl)進(jìn)行額外微調(diào)2濃度和退火溫度,。,

標(biāo)記緩沖液(#PCR-263)推薦用于DNA標(biāo)記或誘變應(yīng)用,。緩沖液是專門為將標(biāo)記或修飾的核苷酸摻入DNA而優(yōu)化的。對于大多數(shù)引物-模板對,，它在廣泛的反應(yīng)條件下給出了優(yōu)異的結(jié)果,，但是擴(kuò)增也可能傾向于增加不準(zhǔn)確性。

MgCl的優(yōu)化2濃度:
MgCl2溶液- 25毫米(#PCR-266)建議用于優(yōu)化最終的Mg2+專注,。最佳功能需要1.5-2.0 mM的濃度。較低的濃度產(chǎn)生較高的特異性,，而較高的濃度產(chǎn)生較高的產(chǎn)量,。

相關(guān)產(chǎn)品:

• dNTP Mix - 10 mM, #NU-1023

• Ruby Buffer, #PCR-272

• Crystal Buffer, #PCR-271

• KCl Buffer, #PCR-262

• MgCl2 Solution - 25 mM, #PCR-266"

上海牧榮生物科技有限公司

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