增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海貝博生物科技有限公司
- 品牌 貝博生物
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/6/25 18:33:57
- 訪問次數(shù) 289
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保存溫度
2-8℃
注意事項(xiàng)
1.長期不用-20℃儲(chǔ)存。
2.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完,！
2.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完,！
有效期
一年
儀器準(zhǔn)備
1.移液器
2.冰箱
3.冰盒
2.冰箱
3.冰盒
試劑準(zhǔn)備
純水
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項(xiàng)
1.ECL工作液配制過程中吸取試劑A和試劑B時(shí)務(wù)必跟換吸頭,，工作液新鮮配制后立即使用，放置過久會(huì)影響靈敏度,。
2.根據(jù)蛋白豐度不同曝光時(shí)間可能是數(shù)秒至數(shù)小時(shí)。
3.曝光時(shí)間過長會(huì)使背景加深,，曝光不足會(huì)導(dǎo)致條帶模糊,。
4.如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜,，重新孵育二抗,，然后重新用ECL發(fā)光和曝光。
5.必須使用高質(zhì)量保鮮膜,。
2.根據(jù)蛋白豐度不同曝光時(shí)間可能是數(shù)秒至數(shù)小時(shí)。
3.曝光時(shí)間過長會(huì)使背景加深,，曝光不足會(huì)導(dǎo)致條帶模糊,。
4.如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜,，重新孵育二抗,，然后重新用ECL發(fā)光和曝光。
5.必須使用高質(zhì)量保鮮膜,。
使用方法
1. 使用合適的方法進(jìn)行 Western,，直至用PBST洗滌二抗。
2. 配制新鮮ECL工作液：試劑A和試劑B按1:1混合均勻后即為ECL工作液,。
3. 印跡膜蛋白面朝上,，用ECL工作液均勻滴加至印跡膜使其覆蓋。ECL工作液使用量大約為0.125ml/cm2膜或根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)習(xí)慣使用,。
4. 用平頭鑷夾住印跡膜,，垂直置于吸水紙以吸去自然流下的多余工作液，注意不能讓膜干掉,。
5. 快速將印跡膜置于二層保鮮膜之間,，盡量趕盡氣泡。
6. 將印跡膜蛋白面朝上,，放于X光膠片暗盒內(nèi),。（如果用顯像儀器直接置于儀器中拍照即可）
7. 在暗室內(nèi)放入X光片，曝光,，顯影,。如果在暗室中可肉眼看到比較亮的條帶，建議曝光1分鐘-3分鐘,；如果肉眼看到的帶比較淡,，建議曝光3-10分鐘；如果很淡或基本看不到帶,，建議曝光10分鐘-30分鐘,。
常見問題分析
1.為什么會(huì)發(fā)生光淬滅？
抗原濃度太高，局部過多的HRP會(huì)快速消耗底物,，導(dǎo)致光信號(hào)過強(qiáng),，條帶呈灼燒樣?？山档涂乖蠘恿?。
操作時(shí)間過長，膜逐漸干掉,。避免膜干掉,。
不良的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣導(dǎo)致設(shè)備或試劑污染。例如鐵銹和不慎沾染的顯影液,、定影液,，會(huì)造成光淬滅，甚至直接導(dǎo)致無熒光,。
抗原濃度太高，局部過多的HRP會(huì)快速消耗底物,，導(dǎo)致光信號(hào)過強(qiáng),，條帶呈灼燒樣?？山档涂乖蠘恿?。
操作時(shí)間過長，膜逐漸干掉,。避免膜干掉,。
不良的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣導(dǎo)致設(shè)備或試劑污染。例如鐵銹和不慎沾染的顯影液,、定影液,，會(huì)造成光淬滅，甚至直接導(dǎo)致無熒光,。
參考文獻(xiàn)
1.Ouyang Chen, Zhouheng Ye et al.
Methane attenuates myocardial ischemia injury in rats through anti-oxidative, anti-apoptotic and anti-inflammatory actions
Free Radical Biology and Medicine 2016 （IF=5.784）
2.Guoming Zhang, Song Gao et al.
Pharmacological Postconditioning with Lactic Acid and Hydrogen Rich Saline Alleviates Myocardial Reperfusion Injury in Rats
Scientific reports 2015 （IF=5.228）
3.Hao Liua, Anmin Chena et al.
A short-hairpin RNA targeting osteopontin downregulates MMP-2 and MMP-9 expressions in prostate cancer PC-3 cells
Cancer Letters 2010 Volume 295, Issue 1, Pages 27-37 （IF=6.508）
Methane attenuates myocardial ischemia injury in rats through anti-oxidative, anti-apoptotic and anti-inflammatory actions
Free Radical Biology and Medicine 2016 （IF=5.784）
2.Guoming Zhang, Song Gao et al.
Pharmacological Postconditioning with Lactic Acid and Hydrogen Rich Saline Alleviates Myocardial Reperfusion Injury in Rats
Scientific reports 2015 （IF=5.228）
3.Hao Liua, Anmin Chena et al.
A short-hairpin RNA targeting osteopontin downregulates MMP-2 and MMP-9 expressions in prostate cancer PC-3 cells
Cancer Letters 2010 Volume 295, Issue 1, Pages 27-37 （IF=6.508）
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