22RV1人前列腺癌細胞（STR鑒定）
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- 公司名稱 上海普依藍生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
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- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/2/11 17:01:03
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BH0004 | 主要用途 | 僅供科研使用 |
22RV1人前列腺癌細胞（STR鑒定）
細胞描述
前列腺癌細胞，該細胞能產(chǎn)生逆轉錄病毒需要在生物安全等級2級的實驗室環(huán)境中操作細胞,。22RV1細胞表達前列腺特異抗原PSA。二羥基睪丸脂酮可輕微刺激細胞生長,，經(jīng)western blot檢測溶解產(chǎn)物與雄激素受體抗體起免疫反應,。EGF可刺激細胞生長,，但TGF-β1不能抑制細胞生長。近期證實22RV1可生產(chǎn)高滴度的人逆轉錄病毒XMRV,。在裸鼠體內(nèi)可成瘤,。
細胞特性
1） 來源：前列腺
2） 含量：>1x106 細胞數(shù)
3） 形態(tài)：上皮樣，貼壁細胞
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5）用途：僅供科研使用,。
22RV1人前列腺癌細胞（STR鑒定）
運輸和保存：干冰運輸及復蘇好存活細胞：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。細胞接收后的處理：
1）收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。若細胞生長密度達70%-80%以上,，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基 87%
優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10%
GlutaMAX-1 1%
Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%
P/S 1%
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二． 細胞處理：
1） 凍存細胞的復蘇：：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液,，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL,，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間）,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中,，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。下面T25瓶為例,；
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù),，來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,，標注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,，-80度冰箱中過夜,，之后轉入液氮容器中儲存。同時記
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