細胞介紹

4T1 是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-Thioguanine抗性細胞株。當注射到BALB/c 小鼠中時,，4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤,，可轉(zhuǎn)移到肺，肝,，淋巴結(jié)和大腦，同時在注射部位形成始發(fā)灶,。誘導轉(zhuǎn)移時不需要摘除始發(fā)灶,。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動物模型,。

4T1-誘導的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉(zhuǎn)移的動力學相近,，可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型。 跟其他腫瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鳥嘌噙特性,，微小的轉(zhuǎn)移細胞團(少到僅僅1個)也可以在許多遠端器官中檢測到,。

該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。

細胞特性

1）來源：小鼠乳腺癌

2）形態(tài)：上皮細胞樣 貼壁生長

3）含量：>1x10^6 細胞數(shù)

4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用,。

細胞篩選

該細胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Luc的細胞,，隨細胞傳代次數(shù)的增加，其Luc熒光強度會逐漸減弱,。若實驗要求需要維持熒光強度,，可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。        

建議收到細胞后至少傳3代,，凍存留種后再進行篩選,。

初次進行細胞篩選時，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基維持培養(yǎng),，若無細胞漂浮或者漂浮較少,，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基繼續(xù)篩選，以此類推,，至最高藥物濃度為5ug/ml,。若篩選過程中，漂浮細胞大于60%,，則停止篩選,，換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細胞密度約80%,，可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選,。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖，可停止篩選,，用不含藥培養(yǎng)基正常培養(yǎng),。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系,。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。

細胞接收后的處理

1）收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。若細胞生長密度達70%-80%以上,，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。