小鼠肺癌細胞綠色熒光標記描述

Lewis肺癌是一種從C57BL小鼠的肺中建立的細胞系,，該細胞帶有原發(fā)性Lewis肺癌的植入所致的腫瘤,，被廣泛用作轉(zhuǎn)移的模型，可用于研究癌癥化學(xué)治療劑的機制,。

該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因,。

細胞特性

1） 來源：小鼠肺癌組織

2）形態(tài)：半貼壁生長，混合形態(tài),，有上皮細胞樣,，松散貼壁或懸浮有梭形、圓形等細胞形態(tài) ,。

3）含量：>1x106  細胞數(shù)

4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用,。

小鼠肺癌細胞綠色熒光標記篩選

該細胞為已經(jīng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GFP的細胞，隨細胞傳代次數(shù)的增加,，其GFP熒光強度會逐漸減弱,。若實驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進行再次篩選,。建議收到細胞后至少傳3代,，凍存留種后再進行篩選。

初次進行細胞篩選時,，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的CM培養(yǎng)基維持培養(yǎng),，若無細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的CM培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,，以此類推,，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,，漂浮細胞大于60%,，則停止篩選，換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),，至細胞密度約80%,，可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,，可停止篩選,，用不含藥CM培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。