TCR（T 細胞受體）蛋白復合物存在于 T 細胞表面,，負責識別與 MHC（主要組織相容性復合物）分子結合的抗原。 TCR 的刺激會導致下游 NFAT（激活 T 細胞核因子）信號的激活,。 NFAT 是一個轉錄因子家族,，在免疫反應中具有重要功能，例如通過誘導 T 細胞中各種細胞因子（例如白細胞介素 2 至 4 和 TNF-α）的表達,。 NFAT 受 Ca2+ 和 Ca2+/鈣調(diào)蛋白依賴性磷酸酶鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié),。

TCR 由兩條不同蛋白質(zhì)鏈的異二聚體組成，其中 α (α) 和 β (β) 鏈是主要鏈,。 使用CRISPR/Cas9基因組編輯去除α鏈和β鏈的TRAC（T細胞受體α常數(shù)）和TRBC1（T細胞受體β常數(shù)1）區(qū)域,，導致TCR丟失。

該細胞系是通過使用慢病毒轉導（CD8a 慢病毒,，BPS Bioscience #78648）外源過度表達人 CD8 (NM_001768.6),，從 TCR 敲除 NFAT 熒光素酶報道 Jurkat 細胞系 (BPS Bioscience #78556) 生成的。 為了實現(xiàn) TCR（T 細胞受體）的敲除,，通過 CRISPR/Cas9 基因組編輯從重組體中去除 TCRα/β 鏈的 TRAC（T 細胞受體 Alpha Constant）和 TRBC1（T 細胞受體 Beta Constant 1）結構域,。 Jurkat 細胞在 NFAT 反應元件的控制下穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶基因。

通過基因組測序和流式細胞術證實了TCR敲除NFAT-熒光素酶報告基因Jurkat細胞中的TCRα/β敲除,，并通過流式細胞術證實了CD8的表達,。 該細胞系已經(jīng)過功能驗證,，與親本 NFAT-熒光素酶報告 Jurkat 細胞 (BPS Bioscience #60621) 不同，該細胞系不會對抗 CD3 激動劑抗體產(chǎn)生反應,。