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AZ00003 All-in-One RT SuperMix for qPCR試劑

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上海創(chuàng)凌生物科技有限公司位于上海楊浦科技園區(qū),,由生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦,,是一家集研發(fā)、銷售,、實驗技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè),。創(chuàng)凌堅持自己的經(jīng)營理念,始終致力面向生命科學(xué)領(lǐng)域,,從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)的學(xué)術(shù)輔助/科研外包,,科研機(jī)構(gòu)及生產(chǎn)企業(yè)所需的各類生產(chǎn)原料、試劑,、儀器,、耗材等的業(yè)務(wù)。勤奮踏實地整合產(chǎn)品資源與技術(shù)資源,,為高校,、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案,幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時間,、節(jié)約科研成本,、提升科研水平、增強(qiáng)企業(yè)市場競爭力,。

自成立以來發(fā)展迅速,,產(chǎn)品服務(wù)得到全國廣大生產(chǎn)企業(yè)、高校,、科研院所,、醫(yī)療系統(tǒng)及相關(guān)試劑公司的肯定,長期合作的客戶遍及全國各地,。為更好地服務(wù)廣大用戶,,不斷降低生產(chǎn)成本并向我們的客戶提供更強(qiáng)大的產(chǎn)品服務(wù),。創(chuàng)凌竭盡所能,與廣大生命科學(xué)工作者攜手迎接屬于生命科學(xué)的21世紀(jì),,共同創(chuàng)造新世紀(jì)的生物技術(shù)革命,。


科研產(chǎn)品,生物試劑,儀器儀表,生物技術(shù)服務(wù)和生物耗材等

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,生物產(chǎn)業(yè),制藥

儲運(yùn)條件

-20℃

產(chǎn)品組成

All-in-One RT SuperMix for qPCR試劑

產(chǎn)品簡介

All-in-One RT SuperMix for qPCR(with dsDNase) 是一款高效、便捷,、減少污染的高質(zhì)量一鏈cDNA 合成試劑盒,,包含M-MLV GIIIReverse Transcriptase 及其反應(yīng)Buffer、RNA 酶抑制劑,、dNTPs,Oligo(dT)20VN 和隨機(jī)引物等一鏈cDNA 合成所需的所有組分,,僅需加入RNA 模板和水即可開始反應(yīng)。All-in-One RT SuperMix for qPCR(withdsDNase) 作為升級后的一鏈cDNA 合成試劑盒,,15 分鐘內(nèi)最長可獲得12 kb cDNA,,產(chǎn)物可用于qPCR、普通PCR 等實驗,。從組織或細(xì)胞中提取的RNA 往往殘留基因組DNA 污染,,如果反轉(zhuǎn)錄前不做去除處理,下游進(jìn)行qPCR 反應(yīng)時基因組DNA 與cDNA會同時進(jìn)行擴(kuò)增,,尤其是引物設(shè)計在同一外顯子上時,,影響定量準(zhǔn)確性。本試劑盒所采用的dsDNase 能夠特異性消化雙鏈DNA 或DNARNA雜合雙鏈中的DNA,,并且具有熱敏感性,,在逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度下即可快速不可逆地失活。與傳統(tǒng)使DNase I 去除基因組DNA 污染的方法相比,,dsDNase 無需額外加入EDTA 進(jìn)行失活,,不僅節(jié)省實驗時間,而且降低了對逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的抑制,??梢罁?jù)基因組DNA 污染嚴(yán)重程度,選擇去基因組DNA 污染與反轉(zhuǎn)錄分開進(jìn)行,,或者去基因組DNA 污染與反轉(zhuǎn)錄一步進(jìn)行的操作方法,。

使用方法

針對基因組DNA 含量低的RNA 樣品(推薦方案)

All-in-One RT SuperMix for qPCR試劑

① 于冰上配制如下反應(yīng)體系:

a. 推薦使用試劑盒提取的高質(zhì)量RNA 作為模板。

② 輕柔吸打混勻,,瞬離,;

③ 37℃溫育2 min,以去除基因組DNA 污染,;

④ 55℃溫育15 min,;

⑤ 反應(yīng)結(jié)束后,85℃溫育2 min 以終止反應(yīng),;

⑥ 迅速將獲得的cDNA 置于冰上,,用于后續(xù)實驗,;或立即保存于-20℃。

針對基因組DNA 含量高RNA 樣品

1. 基因組DNA 污染去除

① 于冰上配制如下反應(yīng)體系:

a. 推薦采用試劑盒提取的RNA 作為模板,。

② 輕柔吸打混勻,,瞬離;

③ 37℃溫育2 min,,以去除基因組DNA 污染,;

注:若RNA 中基因組DNA 污染嚴(yán)重,可適當(dāng)延長37℃溫育時間至5 min,。

④ 65℃溫育2 min,,使dsDNase 失活,然后置于冰上,。

2. 第一鏈cDNA 合成

① 于冰上配制如下反應(yīng)體系:

② 輕柔吸打混勻,瞬離,;

③ 50℃溫育15 min,;

注:若目標(biāo)RNA 不含Poly(A) 結(jié)構(gòu),可預(yù)先25℃溫育10 min,。

④ 反應(yīng)結(jié)束后,,85℃溫育2 min,以終止反應(yīng),;

⑤ 將獲得的cDNA 溶液置于冰上,,用于后續(xù)實驗。

注:cDNA 溶液置于-20℃儲存,,建議不超過1 周,;置于-80℃可長期儲存。

注意事項

預(yù)混液中已經(jīng)包含Oligo(dT)20VN 和隨機(jī)引物,,不僅適用于包含Poly(A) 結(jié)構(gòu)的真核生物mRNA,,也適用于不含Poly(A) 結(jié)構(gòu)的原核生物RNA、真核生物rRNA 和tRNA 等模板,,但不適用于miRNA 等小RNA 模板,。

美國Azaood公司成立于2004年,是一家開發(fā)和生產(chǎn)用于生命科學(xué)研究,、診斷和生物技術(shù)應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,、蛋白質(zhì)、核酸和細(xì)胞分離試劑盒,、胎牛血清的,;Azood公司是通過了ISO9001認(rèn)證的主要制造商,可以滿足從研究到大規(guī)模批量生物加工和OEM應(yīng)用與要求的公司,。





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