人T細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)試劑盒是為在體外活化和擴(kuò)增人T細(xì)胞而專門設(shè)計的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可高效活化人幼稚CD4+T或CD8+T細(xì)胞,，并且達(dá)到高效擴(kuò)增的目的,，是研究人T細(xì)胞分化和功能的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。

產(chǎn)品特點

針對人T細(xì)胞的活化和擴(kuò)增而設(shè)計

產(chǎn)品成分

其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑和組分

人T細(xì)胞磁珠分選試劑

*培養(yǎng)基配制

(在無菌生物安全柜中,，開展以下操作)

1.在4℃冰箱解凍補充因子和胎牛血清,，混勻后使用。

2.活化培養(yǎng)基配制：將1體積的活化補充因子和4體積的胎牛血清加入到35體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻,，得到人T細(xì)胞活化培養(yǎng)基,。如取100ul補充因子和400ul胎牛血清加入至3.5ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類推,。

擴(kuò)增培養(yǎng)基配制：將1體積的成熟補充因子和10體積的胎牛血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,，充分混勻，得到人T細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基,。如取100ul補充因子和1ml胎牛血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，以此類推。

使用說明

(請詳細(xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實驗)

1.使用磁珠分選人外周血單個核細(xì)胞中T細(xì)胞（參考所使用試劑盒的說明書），計數(shù),。

2.D0：使用活化培養(yǎng)基重懸T細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度至1*10^6/ml，按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板：

3.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱,，37℃,，5%CO2，靜置培養(yǎng),。

4.D2：補充1/4初始培養(yǎng)體積的新鮮活化培養(yǎng)基（參考步驟2表格）,。

5.D3：擴(kuò)孔,。

1)收集細(xì)胞，離心去除活化培養(yǎng)基,，使用擴(kuò)增培養(yǎng)基重懸,，計數(shù)；

2)調(diào)整細(xì)胞密度至5*10^5/ml,，按照如下表格將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板,，繼續(xù)擴(kuò)增培養(yǎng)T細(xì)胞：

6.D5/D7：細(xì)胞計數(shù)，按照步驟5所示進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增,，或收集細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作和分析,。

數(shù)據(jù)展示

圖：人T細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)鑒定。分選的人CD4+T細(xì)胞按照試劑盒說明活化后第三天,，顯微鏡下觀察克隆形成（A）,；分選的人CD4+T和CD8+T細(xì)胞按照試劑盒說明培養(yǎng)至圖示天數(shù)，收集細(xì)胞計數(shù)計算擴(kuò)增倍數(shù)（B）