?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測,。

CHL 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

CHL細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持CHL細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含 CHL細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于CHL 細(xì)胞的培養(yǎng),。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                        445 ml

特級胎牛血清                            50 ml

 運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光,，保存2個月,；?

注意僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

小鼠胃動素(MTL)ELISA pcr檢測試劑盒

Human phospholipase C (PLC) ELISA Kit 人0酯酶C(PLC)試劑盒

HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 人孤腓肽(OFQ/N)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenIerleukin1β,IL-1β試劑盒雞白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒

People gathered protein (Agrin) ELISA Kit 人聚集蛋白(Agrin)試劑盒

Porcinesodium-glucosecoanspoer1,SGLT1ELISAKit 豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(SGLT1)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforALP(Humanalkalinephosphatase)ELISAKit人堿性0酸酶

血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit小鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠纖連蛋白試劑盒   小鼠纖連蛋白試劑盒      小鼠纖連蛋白試劑盒,，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠纖連蛋白試劑盒,、小鼠纖連蛋白試劑盒

小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒   小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒      小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒,，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒,、小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒

小鼠lisa試劑盒   小鼠試劑盒      小鼠試劑盒，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒、小鼠lisa試劑盒

小鼠網(wǎng)膜素試劑盒   小鼠網(wǎng)膜素試劑盒      小鼠網(wǎng)膜素試劑盒,，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠網(wǎng)膜素試劑盒,、小鼠網(wǎng)膜素試劑盒

液泡蛋白分選蛋白25抗體

PE標(biāo)記小鼠CD152單克隆抗體

TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein

血小板衍生生長因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)

HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白

RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/???

CHL 細(xì)胞專用培養(yǎng)基血小板衍生生長因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)

CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白

TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein

RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白

HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein