HT-3 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

HT-3細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持HT-3細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含HT-3細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無(wú)需添加任何成分，可直接用于HT-3細(xì)胞的培養(yǎng),。

產(chǎn)品主要成分

Mccoy`s 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基                             445mL

特級(jí)胎牛血清                                             50 mL

 運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃,，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫(xiě)上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

豬D二聚體(D2D)ELISA 試劑盒

Human ai hepatitis C virus aibody (ai-HCV) ELISA Kit 人抗型肝病毒抗體(ai-HCV)試劑盒

PorcineFollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 豬促卵泡素(FSH)試劑盒分裝

CLIAKitforaGT(Humanangiotensinogen)ELISAKit人血管緊張素原

血液葡萄糖-6-0酸脫氫酶(G6PD)活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒50次

MouseoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒

小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒

Rat ai endomysial aibody IgA (EMA IgA) ELISA Kit 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒

HumanHemoglobinH,HbHELISAKit 人血紅蛋白H(HbH)試劑盒分裝

Humanamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42試劑盒96T人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒

植物多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量試劑盒20次

MonkeyCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit猴Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒

植物蔗糖含量試劑盒   可見(jiàn)分光光度法    50管/48樣

糖原含量試劑盒   可見(jiàn)分光光度法    50管/48樣

α-試劑盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/24樣

β-試劑盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/24樣

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框15抗體

蛋白酶激活受體3抗體

TGFBI重組人 TGFBI / BIGH3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

鹽皮質(zhì)激素受體(MR)重組蛋白 Recombinant Mineralocorticoid Receptor (MR)

HA重組甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AGO2 Protein Human 重組人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

R???

HT-3 細(xì)胞專用培養(yǎng)基鹽皮質(zhì)激素受體(MR)重組蛋白 Recombinant Mineralocorticoid Receptor (MR)

AGO2 Protein Human 重組人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TGFBI重組人 TGFBI / BIGH3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

RSV-G Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重組人類(lèi)呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 蛋白 (95% Homology) (His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買(mǎi)已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染,，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類(lèi)型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè)。