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Cas9x3.0 CRISPR基因敲除試劑盒

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公司簡介拼圖(1).jpg


蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(BiobayA5301室,。公司管理團(tuán)隊專注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年,,擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),,涵蓋各大高校,、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、檢測中心,、科研機(jī)構(gòu),、制藥企業(yè)等13個群體。代理的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,,PCR儀,,移液器,生物反應(yīng)器,,發(fā)酵罐,,移液器,,超低溫冰箱,醫(yī)用冰箱,,液氮罐,,高壓滅菌器,超純水機(jī),,天平,,離心機(jī)等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器,、朗基,、中科美菱,梅特勒,,樂楓,,搏旅、NEST,、天根,、奧盛在內(nèi)等多家等。在提供產(chǎn)品的同時也為您提供生物實(shí)驗(yàn)室常用的耗材試劑,,以及實(shí)驗(yàn)室整體搬遷,、第三方檢測、計量與校準(zhǔn),,二手儀器調(diào)劑等服務(wù),。完整的實(shí)驗(yàn)室一站式體驗(yàn)使您的選擇更加方便、快捷,、靈活,。

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合

CRISPR基因敲除試劑盒


| 產(chǎn)品名稱:CRISPR基因敲除試劑盒

| 產(chǎn)品貨號:Cas9x3.0

| 產(chǎn)品介紹

該試劑盒(Cas9x3.0)是海星生物在多年基因編輯服務(wù)的基礎(chǔ)上研發(fā)的高效快捷的基因敲除試劑盒,。包括了人(Human) 和小鼠(Mouse)的所有基因的敲除,。

Cas9x3.0試劑盒包含2個Cas9X™算法優(yōu)化的 gRNA序列載體和特異的同源DNA片段,DNA片段含有抗性和GFP 熒光,,并攜帶有一段特殊同源序列,,不僅可為后續(xù)基因敲除細(xì)胞的篩選提供藥物抗性,,也可以通過流式篩選獲得敲除細(xì)胞,。

Cas9x3.0試劑盒對分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞都有非常高的敲除效率。

| 產(chǎn)品特點(diǎn)

敲除高效率——比病毒敲除方式更實(shí)惠,、更穩(wěn)定,、更安全

實(shí)驗(yàn)超簡單——操作流程簡單,能養(yǎng)好細(xì)胞就能做基因敲除

| 產(chǎn)品構(gòu)成


產(chǎn)品構(gòu)成

| 產(chǎn)品原理

Cas9x3.0試劑盒依據(jù)HDR和 NHEJ修復(fù)原理進(jìn)行產(chǎn)品開發(fā),。

優(yōu)化的gRNA引導(dǎo)Cas9蛋白對特定位點(diǎn)進(jìn)行切割,,產(chǎn)生DNA 雙鏈斷裂(Double-Strand Break, DSB),并誘導(dǎo)同源線性化DNA片段(攜帶抗性基因和熒光基因)整合到該位點(diǎn),,再通過抗性藥物(puroR )或熒光(GFP)進(jìn)行篩選,,從而獲得基因敲除的細(xì)胞和單克隆。

該試劑盒 (Cas9x3.0) 的敲除效率是傳統(tǒng)基因敲除策略的2~5倍,。因?yàn)榈某呗允峭ㄟ^在基因位導(dǎo)入 Donor DNA( puroR & GFP )從而達(dá)到敲除目的蛋白效果,,同時也可以在DSB位點(diǎn)導(dǎo)入序列移碼,導(dǎo)致蛋白翻譯提前終止,。這兩個原理的疊加,,可以輕松獲得“等位基因”純合敲除細(xì)胞株。

<strong>CRISPR基因敲除試劑盒</strong>1

| 應(yīng)用流程

該基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)操作步驟(脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法):

本試劑盒建議采用轉(zhuǎn)染試劑是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030),,具體參照轉(zhuǎn)染試劑說明材料,。不同類型的轉(zhuǎn)染試劑,請按照制造商的操作說明進(jìn)行轉(zhuǎn)染,。

注意:懸浮細(xì)胞不推薦使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法,。

基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)操作步驟(電轉(zhuǎn)化法):

本試劑盒推薦Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng),具體參照設(shè)備對每種細(xì)胞參數(shù)。不同類型的電轉(zhuǎn)設(shè)備,,請按照制造商的操作說明進(jìn)行優(yōu)化,。

注意:懸浮細(xì)胞推薦使用電轉(zhuǎn)化法。


細(xì)胞轉(zhuǎn)染


該基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)配有eGFP對照DNA,,可以按照實(shí)際使用的方法和細(xì)胞情況,,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)摸索,建議48小時后的目的細(xì)胞的eGFP的陽性率不低于50%,, Cas9x3.0試劑盒才能獲得良好的敲除效果,。





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