軟瓊脂克隆形成服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟

1.獲取樣本,，培養(yǎng)細(xì)胞，

2.調(diào)整細(xì)胞懸液密度為1x103個(gè)/ml細(xì)胞,。

3.制備底層瓊脂,，溶化的5%瓊脂和 37℃ 左右預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液以1:9比例在 40℃ 均勻混合，加入培養(yǎng)皿(直

徑 60mm)中,，每皿含0.5%瓊脂培養(yǎng)基2ml,，室溫下瓊脂凝固。

4.制備上層瓊脂 37℃ 密度每川含200個(gè)的細(xì)胞懸液1.5ml移入小燒杯中,，加入 40℃,、5%瓊脂等體積混勻，即成0.25%半固體瓊脂培養(yǎng)基,。配好的半固體瓊脂培養(yǎng)其立即加入鋪有底層瓊脂的培養(yǎng)用中，率溫下瓊脂凝固,。37℃,，5%CO2靜罟培養(yǎng)2-3周。

5.當(dāng)培養(yǎng)血中出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)克降時(shí),，終止培養(yǎng),，棄去培養(yǎng)液，PBS液小心浸洗2次,，空氣干燥,，甲醇固定15分鐘，棄甲醇空氣干燥,，用Giemsa染液染色10分鐘,，流水緩慍洗去邊液，空氣干燥,。

軟瓊脂克隆形成服務(wù):伊萊博生物擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持和實(shí)驗(yàn)操作人員團(tuán)隊(duì),，核心成員來(lái)自中科院、復(fù)旦,、交大,、同濟(jì)等國(guó)內(nèi)重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu)，能夠提供前沿的,、完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)咨詢(xún)與服務(wù),。為了響應(yīng)國(guó)家大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號(hào)召，推動(dòng)實(shí)驗(yàn)科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步,，伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢(shì),，為廣大科研工作者提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù)，從理論和實(shí)操兩個(gè)部分，培養(yǎng)其科研思維以及解決問(wèn)題的能力,，為今后的科研工作奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ),。