TUNEL檢測技術(shù)服務(wù)
- 公司名稱 伊萊博生物科技(上海)有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2023/10/30 17:46:39
- 訪問次數(shù) 748
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1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;
2.用梯度7醇(100.95.90.80,、70%)各浸洗1次,,每次3min:注:上面兩步是針對石蠟切片樣木的外理
3.用Proteinase K作液外理組織15 30 min 在21-370(溫度,、時間、濃度均需摸索)或者加細胞通透液8min
4.PBS漂洗2次;
5.制備TUNEL反應(yīng)混合液,,處理組用50ulTdT+450ul 熒光素標記的dUTP液混勻;而陰性對照組僅加50ul 熒光素標記的dUTP液,,陽性對照組先加入100ul DNase 1,反應(yīng)在15~25℃x10min,,后面步驟同處理組,。
6.玻片干后,加50uI TUNEL反應(yīng)混合液(陰性對照組僅加50u熒光素標記的dUTP液)于標本上,,加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37℃x1h,。
7.PBS漂洗3次;
8. 可以加1滴PBS在熒光顯微鏡下計數(shù)凋亡細胞(激發(fā)光波長為450~500nm,檢測波長為515~565nm);
9.玻片干后加50ul converter-POD干標本上,,加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37°cx30min.
10.PBS漂洗3次,,
11.在組織處加50~100uIDAB底物,反應(yīng)15~25℃℃x10min;
12.PBS漂洗3次;
13.拍照后再用蘇木素或電其綠復(fù)染,,幾秒后立即用自來水沖洗,。梯度灑精脫水,二電苯透明,,中性樹膠封片,。
14.加一滴PBS或甘油在視野下,用光學(xué)顯微錯觀察凋廣細胞(共計200~500個細胞)并拍照,,可結(jié)合調(diào)廣細胞形太特征來綜合判斷(未染色細胞變小,,胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,晚期出現(xiàn)凋亡小體,,貼壁細胞出現(xiàn)鄒縮,、變圓、脫落;而染色細胞呈現(xiàn)染色質(zhì)濃縮,、邊緣化,,核膜裂解,染色質(zhì)分割成塊狀/凋亡小體,。
我們擁有專業(yè)的實驗室,、精良的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員(博士后)2人,,助理研究員(博士)4人,,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué),、轉(zhuǎn)錄組學(xué),、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué),、生物化學(xué),、病理檢測,、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細分,、較好的的服務(wù)平臺,,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,,及,,涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué),、免疫學(xué),、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué),、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域,。