詳細信息：

1.  表面標記或生物合成標記的細胞在裂解緩沖液中于4℃放置1 h 后,，再于4℃3 000 g 離心10 min 除去細胞核,，然后將所得上清在10000 g 離心1 min。

 2.  一次性對上清進行預(yù)處理,，每200 μl 上清加入10 μl 活化后被淬滅的瓊脂糖對照,。在旋轉(zhuǎn)揺床中室溫揺蕩2 h 或在4℃過夜。200 g 離心1 min,，保留上清,。

 3.  在1.5 ml 的微量離心管中加滿裂解液室溫作用10 min，對其進行預(yù)包被,。吸去液體后,，加入105~106 cpm 的含抗原的放射性標記上清，加稀釋緩沖液使終體積為200 μl,。 

4.  加入10 μl 1：1的抗體-Sepharose偶聯(lián)物膠漿/稀釋緩沖液,。4℃在旋轉(zhuǎn)搖床中搖蕩1. 5~3 h，一直保持Sepharose呈混懸狀,。

5.  Sepharose偶聯(lián)物依次用1 ml 下面列出的緩沖液洗滌,。毎次洗完后，200 g 離心5 min 或微量離心5 s,。以細頭的巴斯德吸管小心吸去上清,，僅在沉淀的上面留10 μl 的液體。在第4次洗滌后,，離心甩下管壁所有殘余液滴并將其吸去,，沉淀上僅留下約 10 μl。

6.   加入20~50 μl SDS樣品緩沖液,。由于樣品緩沖液比重大于洗滌緩沖液,，它可滲透到Sepharose中，不要用旋渦混合器旋起SEpharose,，以免使之粘附在緩沖液液面以上的管壁,。蓋緊蓋子，于100℃保溫5 min,。

7.  用旋渦混合器混勻,，200 g 離心或微量離心5 s。將上清加樣于凝膠以SDS-PAGE分析,，使用增感屏進行放射自顯影或熒光自顯影或檢測標記蛋白質(zhì),。

伊萊博生物擁有專業(yè)的技術(shù)支持和實驗操作人員團隊，核心成員來自中科院,、復(fù)旦,、交大、同濟等國內(nèi)重點高校及科研機構(gòu),，能夠提供前沿的,、完善的實驗技術(shù)咨詢與服務(wù)。