人T細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)試劑盒是為在體外活化和擴(kuò)增人T細(xì)胞而專門(mén)設(shè)計(jì)的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可高效活化人幼稚CD4+T或CD8+T細(xì)胞,，并且達(dá)到高效擴(kuò)增的目的，是研究人T細(xì)胞分化和功能的重要培養(yǎng)系統(tǒng),。

產(chǎn)品特點(diǎn)

針對(duì)人T細(xì)胞的活化和擴(kuò)增而設(shè)計(jì)

產(chǎn)品成分

其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑和組分

人T細(xì)胞磁珠分選試劑

*培養(yǎng)基配制

(在無(wú)菌生物安全柜中,，開(kāi)展以下操作)

1.在4℃冰箱解凍補(bǔ)充因子和胎牛血清，混勻后使用,。

2.活化培養(yǎng)基配制：將1體積的活化補(bǔ)充因子和4體積的胎牛血清加入到35體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,，充分混勻,，得到人T細(xì)胞活化培養(yǎng)基。如取100ul補(bǔ)充因子和400ul胎牛血清加入至3.5ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，以此類(lèi)推,。

擴(kuò)增培養(yǎng)基配制：將1體積的成熟補(bǔ)充因子和10體積的胎牛血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻,，得到人T細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基,。如取100ul補(bǔ)充因子和1ml胎牛血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類(lèi)推,。

使用說(shuō)明

(請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀使用說(shuō)明后再開(kāi)始相關(guān)實(shí)驗(yàn))

1.使用磁珠分選人外周血單個(gè)核細(xì)胞中T細(xì)胞（參考所使用試劑盒的說(shuō)明書(shū)）,，計(jì)數(shù),。

2.D0：使用活化培養(yǎng)基重懸T細(xì)胞,，調(diào)整細(xì)胞密度至1*10^6/ml,，按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板：

3.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱,，37℃，5%CO2,，靜置培養(yǎng),。

4.D2：補(bǔ)充1/4初始培養(yǎng)體積的新鮮活化培養(yǎng)基（參考步驟2表格）。

5.D3：擴(kuò)孔。

1)收集細(xì)胞,，離心去除活化培養(yǎng)基,，使用擴(kuò)增培養(yǎng)基重懸，計(jì)數(shù),；

2)調(diào)整細(xì)胞密度至5*10^5/ml,，按照如下表格將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板，繼續(xù)擴(kuò)增培養(yǎng)T細(xì)胞：

6.D5/D7：細(xì)胞計(jì)數(shù),，按照步驟5所示進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增,，或收集細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作和分析。

數(shù)據(jù)展示

圖：人T細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)鑒定,。分選的人CD4+T細(xì)胞按照試劑盒說(shuō)明活化后第三天,，顯微鏡下觀察克隆形成（A）；分選的人CD4+T和CD8+T細(xì)胞按照試劑盒說(shuō)明培養(yǎng)至圖示天數(shù),，收集細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)算擴(kuò)增倍數(shù)（B）