ZJU-0430+luc人膽囊癌細(xì)胞+luc

,ZJU0430 luc

貨號：YJ-0024a（STR（ZJU0430鑒定））

價格： 3200.0

規(guī)格： 1*10 ⁶

細(xì)胞描述

細(xì)胞是從一名74歲男性胃膽囊癌患者組織中分離得到,，ZJU-0430的遷移,，侵襲和增殖能力遠(yuǎn)大于GBC-SD細(xì)胞，可用于膽囊癌（GBC）的發(fā)病機(jī)理和治療的臨床前研究,，并可能有助于開發(fā)早期診斷工具以及潛在的靶向療法,。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。

細(xì)胞特性

1） 來源：人,，男性,，膽囊癌

2） 形態(tài)：上皮樣，貼壁生長

3） 含量：>1x10⁶  細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用,。

細(xì)胞篩選

該細(xì)胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Luc的細(xì)胞,，隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加，其Luc熒光強(qiáng)度會逐漸減弱,。若實(shí)驗(yàn)要求需要維持熒光強(qiáng)度,，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。        

建議收到細(xì)胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選,。

初次進(jìn)行細(xì)胞篩選時,，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的*培養(yǎng)基維持培養(yǎng)，若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少,，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的*培養(yǎng)基繼續(xù)篩選，以此類推,，至最高藥物濃度為5ug/ml,。若篩選過程中，漂浮細(xì)胞大于60%,，則停止篩選,，換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細(xì)胞密度約80%,，可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選,。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時細(xì)胞正常增殖，可停止篩選,，用不含藥*培養(yǎng)基正常培養(yǎng),。

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1) 準(zhǔn)備：1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基(推薦：YJ-0002)，優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %,，P/S 1 %

2) 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二．細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。ZJU-0430+luc人膽囊癌細(xì)胞+luc

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：