聚合酶鏈反應(yīng)分析儀,，核酸提取儀溫度校準(zhǔn)溫度準(zhǔn)確性是PCR儀重要的性能指標(biāo),，如溫度準(zhǔn)確性低可直接造成非特異性擴(kuò)增，甚至是錯(cuò)誤的擴(kuò)增結(jié)果,，造成假陽性和假陰性,。

市場(chǎng)上各家廠商考核基因擴(kuò)增儀（PCR儀）性能的主要指標(biāo)，一般廠家的企業(yè)指標(biāo)為±0.5℃,，一些性能較好的產(chǎn)品可以實(shí)現(xiàn)的溫度準(zhǔn)確度為±0.3℃,。故需對(duì)PCR儀控溫準(zhǔn)確度進(jìn)行測(cè)試。

校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)平均溫度的計(jì)算公式為：I—參加檢測(cè)的溫度探頭序號(hào),；n—參加檢測(cè)的溫度探頭的數(shù)量

（二）,、溫場(chǎng)均勻性

由于PCR儀加熱器加熱不均勻,，導(dǎo)致PCR儀模塊上各孔存在一定溫差。造成試驗(yàn)結(jié)果偏差,。一般PCR儀邊緣點(diǎn)的溫度低于中間區(qū)域,，所以均勻性為PCR儀重要的性能指標(biāo)。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定均勻性為±0.5℃,，一些性能較好的產(chǎn)品可以實(shí)現(xiàn)的溫度均勻度為±0.3℃,。

校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，

聚合酶鏈反應(yīng)分析儀,，核酸提取儀溫度校準(zhǔn)通過選取孔板中16個(gè)特殊反應(yīng)位置來測(cè)量溫度,，并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個(gè)探頭在同一時(shí)刻max溫度與min 溫度的差值,。均勻度計(jì)算公式為：tmax-tmin

（三）,、升降溫速率

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物數(shù)量的多少?zèng)Q定了PCR的效率。為了在短時(shí)間內(nèi)獲得盡可能多的產(chǎn)物,，需要儀器在升降溫段具有按照預(yù)設(shè)升降溫速率快速升溫和降溫的能力（max-升溫速率達(dá)15~20℃）,。一個(gè)完整的PCR過程，是由若干個(gè)升溫→恒溫→降溫循環(huán)構(gòu)成的,。因?yàn)椤白冃浴?，“退火”和“延伸?個(gè)階段是必須要保證的。因此,，只有使升降溫的過程盡可能地迅速,，才能縮短每個(gè)PCR循環(huán)以及整個(gè)PCR 過程所需時(shí)間。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定升溫速率為±3℃/sec,。

儀器校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)時(shí),，升溫速率為溫度從40℃到90℃的時(shí)間；降溫速率為溫度從70℃到35℃的時(shí)間,。