膠體金免疫層讀卡儀功能應用及原理

膠體金（colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷,、抗壞血酸、枸櫞酸鈉,、鞣酸等作用下,，金離子還原后聚合成的一定大小的金顆粒，它由一個基礎的晶核（11個金原子形成的二十面體）和包圍在外的雙離子層構成（內層為負離子層AuCl2-,外層是帶正電荷的H+）,。由于靜電作用,，金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，形成帶負電的疏水膠溶液,，故稱膠體金,。

膠體金具有高電子密度，能與多種生物大分子結合，已成為繼熒光素,、放射性同位素和酶之后,，在免疫標記技術中較常用的一種非放射性示蹤劑。膠體金的粒徑一般在1-100nm之間,，能夠均勻,、穩(wěn)定地分散在液體中，呈球形小顆?；驒E圓形大顆粒,。膠體金顆粒最外層可以吸附大量的正離子，能夠均勻分散在溶液中,。由于膠體金表面呈負電性,，能夠與表面帶正電荷的抗原、抗體通過靜電作用進行標記,。

膠體金免疫層讀卡儀可以檢測血凝法,、酶聯(lián)免疫法、膠體金法制成的獸藥,、瘦肉精,、抗生素、動物疫病等快速檢測卡;金標讀卡儀廣泛應用于醫(yī)院學校,、養(yǎng)殖場,、屠宰場、肉產品深加工企業(yè),、檢驗檢疫等單位的食用,。傳統(tǒng)的金標診斷試劑，主要通過目測觀察來判斷檢驗結果,，只能用于定性檢測,，而且受人為因素影響較大，檢測結果無法進行數(shù)據保存,，不便于追蹤溯源和歷史記錄的查詢,，膠體金免疫層讀卡儀可以讀取檢測卡量化的結果值，取代了傳統(tǒng)肉眼觀察結果的方式,，使得檢測結果更加的精準,，客觀，穩(wěn)定,。

膠體金法檢測原理

將特異性的抗體以條帶狀固定在膜上（T線）,，膠體金標記試劑吸附在結合上（金墊），當待檢抗原加到試紙條一端的樣本墊上后,，樣本通過毛細作用向前移動,，溶解結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應,，再移動至固定的抗原或抗體的區(qū)域時，待檢物與金標試劑的結合物又與之發(fā)生特異性結合而被截留,，聚集在檢測帶上,，可通過肉眼觀察到顯色結果。

膠體金技術優(yōu)勢與不足

優(yōu)勢

快速：所有反應能在15分鐘內完成,；

操作簡便：便于個人自測或醫(yī)院檢測,；

成本低：不需要特殊的儀器設備；

穩(wěn)定性好：試劑效期可達兩年或更長時間,；

缺點

較ELISA、化學發(fā)光等方法靈敏度低,；

易出現(xiàn)假陽性,、假陰性；

存在HOOK效應,；

膠體金試劑條組成

膠體金試紙條主要由樣品墊,、金墊、硝酸纖維素膜（NC膜）,、吸水紙4個部分組成,，從上至下依次首尾互相銜接，粘貼在PVC底板上,。

作用

a. 樣品墊：檢測樣本滴加位置,，對檢測樣本具有一定的過濾和緩沖作用，降低樣本中離子強度或酸堿度對檢測結果的干擾,。

b. 金墊：將膠體金標記抗體通過干燥固定在玻璃纖維素膜上,，是追蹤抗體與抗原的反應。

c. 硝酸纖維素膜：膜上預先包被上檢測線和質控線,，能夠與膠體金標記物發(fā)生免疫反應相結合,，使膠體金在檢測線發(fā)生聚集，根據檢測線的顯色狀況進行判讀結果,。

d. 吸水墊：通過吸水作用使液體樣品向上流動,，帶動金墊的金標抗體向上移動，從而與檢測線的抗原發(fā)生反應,。

膠體金讀取儀