甘油檢測試劑盒：甘油是一種非常重要的物質(zhì)，廣泛的應(yīng)用于工業(yè)生物試劑中,，在食品工業(yè)中,，常被作為保濕劑、增香劑和增色劑等使用,，以改良食品的質(zhì)量,。甘油是釀酒酵母發(fā)酵過程中的副產(chǎn)物,也是灰質(zhì)葡萄孢新陳代謝過程中的一個重要產(chǎn)物，甘油是高品質(zhì)果酒的一個成分,，高品質(zhì)的葡萄汁中不含有(或只含有痕量或微量)甘油,，濃度大約為1%(v)，若葡萄汁中含有甘油則意味著產(chǎn)品中使用了品質(zhì)不好的原料,。甘油也常常作為潤滑劑用在洗滌液,、乳酪和牙膏中，在制煙工業(yè)中,，通過通常是預(yù)先向煙葉上噴灑甘油以保障不會粉碎的目的,。 

適用范圍：測定血液,、細胞培養(yǎng)基,、體液,、酒類飲料中的甘油濃度。

組成 ：  

R1試劑 40 ml

R2試劑 10 ml     

4 mmol/L甘油標準品1 ml

4 oC,，儲存3個月,。

所需設(shè)備：酶標儀、生化分析儀或721,、722型可見光分光光度計,。佳工作波長550nm，如無此波長建議優(yōu)先選用570nm,、次選530,、490nm。

操作步驟：

一 樣本處理：

酒類,、飲品,、清澈液體樣本：可直接進行測定，如超過線性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后再測定,。

培養(yǎng)液：取不含酚紅,、無顏色、無血清的細胞培養(yǎng)基,，如有細胞碎片應(yīng)4oC,,，12,000g離心5min,取上清進行測定。

血液：新鮮抗凝血,，4oC,，2,000g離心5min得到血漿；非抗凝血,，先4oC靜置2h得到血清后,，2000g離心10min,除去血細胞。將得到的血漿/血清70oC 加熱10分鐘滅活內(nèi)源脂肪酶,，12,000g離心10min ,取上清測定或-20oC保存,。

二 工作溶液配制：按4:1比例，取4 ml試劑R1與1 ml試劑R2混合,，立即使用或4oC保存<1天,，變色棄去。

三 標準品稀釋：用蒸餾水,、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,，將4 mM甘油標準品倍比稀釋為1000、500,、250,、125、62.5,、31.25,、15.625,、7.8125 µmol/L，通常取其中4~6管即可,，注意設(shè)置0濃度對照反應(yīng)管,。

四 甘油濃度測定：

參見下表進行加樣。為使反應(yīng)時間盡量一致,，減小實驗誤差,，可先加入標準品、待測樣品,，然后再加入工作溶液,。（注意：當甘油濃度較低時，可將待測樣品與工作溶液按照100µl:100µl體積混合,，然后再進行測定,，但是如果樣品體積超過100µl時將會稀釋工作液中酶的濃度，使反應(yīng)靈敏度下降,。如果待測樣品濃度超過線性范圍,，可進行適當稀釋，然后根據(jù)稀釋倍數(shù)來計算樣品中甘油濃度,。）

37oC或25oC反應(yīng) 10分鐘,。反應(yīng)平衡后顏色在60分鐘內(nèi)穩(wěn)定。

先用蒸餾水+工作液的空白管調(diào)零,，然后測定各管OD值,。

繪制標準曲線并計算甘油濃度。

附Excel作圖步驟：各標準管OD值為y軸,，標準品濃度為x軸,。(1)鼠標左鍵圈住數(shù)據(jù)，點擊做圖向?qū)?，選擇-散點圖-,，點擊-完成-。(2)鼠標右鍵點圖上的某一點,，點擊-添加趨勢線-,，點擊-選項-，點擊-顯示公式-和-R2值-,。

甘油檢測試劑盒