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重組核心鏈霉親和素應(yīng)用于哪些領(lǐng)域

來源:南京信帆生物技術(shù)有限公司   2025年03月05日 10:59  

重組核心鏈霉親和素應(yīng)用于哪些領(lǐng)域

品 名:重組核心鏈霉親和素 4( r-cSA4)
英文名稱:Recombinant Core Streptavidin 4
規(guī) 格:1 mg ,,10 mg ,100 mg ,,500 mg
產(chǎn)品形式:冷凍干粉(5mM 磷酸鉀鹽緩沖液,、海藻糖,pH 7.4)
分 子 量:四聚體 55.2kDa,,單體 13.8kDa
活 性:≥16 U/mg 蛋白(Green 改良法測定)
純 度:≥95%(SDS-PAGE 檢測)
濃度測定:紫外吸收法,,消光系數(shù) E(0.1% at 280 nm)=3.042
來 源:大腸桿菌發(fā)酵工程菌株
保存條件:-20℃保存
有 效 期:1年
相關(guān)介紹:
鏈霉親和素(Streptavidin,SA)是阿維丁鏈霉菌(Streptomyces avidinii)在生長過程中分泌的一 種同型四聚體蛋白,。同親和素一樣,,一摩爾的鏈霉親和素可以結(jié)合四摩爾的生物素,與生物素具有 很高的親和力,。由于 SA 不含糖基且等電點接近于中性,,因此 SA 在檢測應(yīng)用中具有比親和素更低的 非特異性結(jié)合水平。富氨基重組核心鏈霉親和素與天然鏈霉親和素相比,,去除與活性無關(guān)的序列,, 僅保留與活性有關(guān)的核心序列,穩(wěn)定性,、溶解性等方面均優(yōu)于天然鏈霉親和素,。并對序列做了修飾, 增加了氨基的含量,,提高了與配體或者磁珠以氨基方式偶聯(lián)的效率(該產(chǎn)品pI:8.93),。
該制品已被廣泛應(yīng)用于多種生物技術(shù)領(lǐng)域,諸如:包被免疫檢測用微孔板,,制備 SA 偶聯(lián)酶制 劑,,SA 偶聯(lián)熒光素、SA 偶聯(lián)磁珠等,,進而參與酶聯(lián)免疫吸附和酶催化放大實驗,,免疫組化化學(xué),、 生物分子純化、生物傳感器,、生物納米微球,、預(yù)靶向制藥研究和生物芯片被料等。
使用方法:(僅供參考)
由于產(chǎn)品生產(chǎn)工藝中凍干環(huán)節(jié)會引入保護劑等,,為減少您的實驗誤差,,建議先通過內(nèi)部檢測方 法,產(chǎn)品中蛋白進行準確定量后,,再進行后續(xù)實驗,,并按實際情況進行產(chǎn)品用量調(diào)整。建議優(yōu)先選 擇紫外吸收法進行定量,,方法如下:
將樣品從低溫條件下拿出后,,平衡至室溫,并擦去瓶外附著的冷凝水,,小心打開瓶蓋,,防止干 粉飛濺損失。用去離子水或緩沖液進行復(fù)溶,,充分溶解后,,稀釋至合適濃度,小心移入比色皿中,, 以去離子水或緩沖液為空白對照,,測定樣品在 280 nm 處的吸光值(建議吸光值控制在 0.1-1.5 區(qū)間內(nèi)),將其代入以下公式計算蛋白質(zhì)濃度:
式中:C:樣品原液的蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度(mg/mL)
A280nm :蛋白質(zhì)溶液在 280nm 處測得的吸光值 N:稀釋倍數(shù)
E(0.1% at 280nm) :1 mg/mL 蛋白質(zhì)的消光系數(shù)
例如將本產(chǎn)品凍干粉充分溶解并混勻后,,取適量原液稀釋 10 倍,,測得其在 280 nm 處的吸光值為 0.9126,則原液的蛋白濃度為 10×0.9126/3.042=3 mg/mL,。
注意事項:
1. 鏈霉親和素凍干粉易溶于水,,溶解性可達 10 mg / mL 或更高;

2. 建議使用純水溶解,;
3. 如有未溶解物質(zhì),,建議延長復(fù)溶時間。也可以通過離心或其他方式除去不溶物后,,再用于后 續(xù)實驗,,不會對總蛋白產(chǎn)生很大的影響,。
4. 考慮到蛋白質(zhì)特殊性,,凍干粉建議現(xiàn)用現(xiàn)配,溶解后應(yīng)避免反復(fù)凍融,,如需多次使用,,建議 按需分裝后凍存(-20℃) ;避免在4℃下長期存放,。


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