Invitrogen TRIZOL RNA提取試劑
- 公司名稱 上海韻涵生物科技有限公司
- 品牌 Invitrogen
- 型號
- 產地 阿根廷
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2022/2/25 13:14:45
- 訪問次數(shù) 847
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生 |
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產品名稱:Invitrogen TRIZOL RNA提取試劑
1.品牌:Invitrogen
2.貨號:15596-026
3.規(guī)格:100ML
4.優(yōu)惠價格:請致電
5.包裝:TRIZOL溶液,棕色瓶裝
6.現(xiàn)貨狀態(tài):現(xiàn)貨
TRIZOL REAGENT生化試劑 Invitrogen原裝TRIZOL REAGENT(貨號:15596-026)操作說明:
Invitrogen TRIZOL RNA提取試劑從組織中提取總RNA
1,、)液氮研磨,,組織塊直接放入研體中,加入少量液氮,迅速研磨,,待組織變軟,,再加少量液氮,再研磨,,如此三次,,按50-100mg組織/mlTrizol加入Trizol,轉移入離心管進行第2步操作,。
2) 勻漿:組織樣品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol,,另外,組織體積不能超過Trizol體積的10%,,否則勻漿效果會不好,,用電動勻漿器充分勻漿約需1-2分鐘。從細胞中提取總RNA,。
1) 培養(yǎng)貼壁細胞:不須消化,,可直接用Trizol進行消化、裂解,,Trizol體積按10cm2/ml比例加入,。
2) 懸浮細胞可直接收集、裂解,,每1ml Trizol可裂解5×106動物,、植物或酵母細胞,或107細菌細胞,。
2.細胞或組織加Trizol后,,室溫放置5min,使其充分裂解,。注:此時可放入-70℃長期保持,。
3.12000rpm 離心5min,棄沉淀,。
4.按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿,,振蕩混勻15分鐘,室溫放置15min,。注:禁用漩渦振蕩器,, 以免基因組DNA斷裂。
5.4℃12000g離心15min,。
6.吸取上層水相,,至另一離心管中。
注:
1)千萬不要吸取中間界面,。
2)若同時提取DNA和蛋白質,,則保留下層酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,,則棄下層酚相。
7.按0.5ml異丙醇/ml Trizol 加入異丙醇混勻,,室溫放置5-10min,。
8.4℃ 12000g離心10min,棄上清,,RNA沉于管底,。
9.按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇,溫和振蕩離心管,,懸浮沉淀,。
10.4℃ 8000g離心5min,盡量棄上清,。
11.室溫晾干或真空干燥5-10min,。注:RNA樣品不要過于干燥,否則很難溶解,。
12.可用50ul H2O,,TE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品,55-60℃5-10min,。 注:H2O,、TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓。 12,、測O.D值定量DNA濃度。
注:1)此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之間,。 2) 產率估計:組織標本:(ug RNA/mg組織)1-10ug,,培養(yǎng)細胞(ug RNA/106 Cell):5-15ug。
注:
1,、組織或細胞量過少,,可酌情減少Trizol用量。
2,、組織或細胞用量過多,,會引起DNA對RNA的污染。
3,、高蛋白,,脂肪或多糖類組織,肌肉組織或塊狀植物組織等,,組織勻漿或液氮研磨 后須4℃ 1200離心10min去掉不溶物,,再進行下面操作,若頂層有脂肪物,,則 也須去掉,。
4、熱天提RNA,帶手套是必須的,,手是RNase的主要來源,。
5、組織塊用液氮研磨,,效果,,若沒有液氮或電動勻漿器,可用手動勻漿器代替,,此時組織塊不宜過大,,且需先用眼科剪將組織絞碎,然后再充分研磨,。
另有:invitrogen TRIzol:emoji: Reagent 15596018 200ML 包裝試劑,,更多優(yōu)惠 盡在韻涵生物!