犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA試劑盒使用說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA檢測試劑盒

英文名稱：Hydatid（ Hyd） coproantigens Test Kit for Canine.

【用途】 本試劑盒采用夾心ELISA方法定性檢測犬糞細粒棘球絳蟲抗原,。

【規(guī)格】 96T/盒

【儲藏與有效期】 2～8℃保存,，有效期12個月,。

【試劑盒組成】

【犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA試劑盒使用說明書溶液配制】

1. 洗滌液配制：用蒸餾水或去離子水將洗滌液 10×按 1:9 稀釋，充分混勻即為工作濃度洗滌液,。

2. 樣品稀釋液配制：用蒸餾水或去離子水將樣品稀釋液 2×按1:1 稀釋（如取100mL 濃縮樣品稀釋液加 100mL 蒸餾水或去離子水）,，充分混勻即為工作濃度樣品稀釋液。

【實驗準備】所有試劑使用前恢復(fù)至室溫(25℃左右),，以免溫度過低影響抗原抗體反應(yīng),。

【樣品要求】
1. 本試劑適用于檢測犬糞樣品；
2. 應(yīng)采集新鮮的犬糞樣品進行測試,。若不能及時檢測,，應(yīng)將糞樣低溫凍存，防止反復(fù)凍融,。如犬糞難以溶解,，應(yīng)適當搗碎處理。

【操作步驟】

1. 樣品處理：犬糞樣品需要預(yù)先低溫（ -70℃以下） 冷凍 7 天以上,，以滅活蟲卵,。稱取 1克犬糞,加入1mL樣品稀釋液，充分攪拌混勻,，靜置10分鐘,，再3000rpm離心10分鐘，取上清液待檢,。
2. 加樣反應(yīng)：樣品孔,，每孔僅加入100μL待檢樣品；陰性對照2孔,，每孔僅加入100μL陰性對照品,；陽性對照 2 孔，每孔僅加入 100μL 陽性對照品,。蓋好封板膜,，37℃避光反應(yīng)30分鐘。

3. 洗板：甩去孔內(nèi)液體,，每孔注滿工作濃度洗滌液洗板3 次,，每次均需靜置1分鐘；最后一次甩凈,，拍干,。

4. 加酶反應(yīng)：每孔加酶結(jié)合物100μL，蓋好封板膜,，37℃避光反應(yīng)30分鐘,。甩去孔內(nèi)液體，如上洗板,，拍干,。

5. 顯色反應(yīng)：按所需用量,，臨用前取等體積底物液和顯色液充分混勻后每孔加100μL，蓋好封板膜,，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

6. 終止反應(yīng)：加終止液50μL,，用酶標儀于450nm波長（630nm作為參比波長）讀取OD值,。

【結(jié)果判定】

1. Cut-off 值（COV）=陰性對照平均OD值×2.1（陰性對照孔OD 值＜0.15 時按0.15計）。
2. 有效性判定：
陰性對照孔 OD 值≤0.30（ 若大于 0.30 則實驗無效）,；
陽性對照孔 OD 值≥0.50（ 若小于 0.50 則實驗無效）,。

【判定標準】

樣品 OD 值≥COV， 判為犬細粒棘球絳蟲抗原陽性,；
樣品 OD 值＜COV,， 判為犬細粒棘球絳蟲抗原陰性。

【檢驗方法的局限性】本試劑盒僅供篩查,，不作為確診依據(jù),。

【注意事項】

1. 所有試劑使用前恢復(fù)至室溫(25℃左右)，以免溫度過低影響抗原抗體反應(yīng),。

2. 實驗前應(yīng)用溫度計檢查溫箱溫度,，溫度過高或過低影響OD值高低。

3. 包被板反應(yīng)時嚴禁堆疊放置,，應(yīng)該平鋪且板間有空隙,，不要離溫箱壁太近。

4. 實驗所用移液器及設(shè)備應(yīng)定期校準,。

5. 底物液和終止液對皮膚有刺激性,，請帶手套注意個人防護。

長期提供原核,、真核蛋白表達構(gòu)建服務(wù)

長期 提供抗原偶聯(lián),、 HRP、生物素,、糖基化,、親和素、FITC等偶聯(lián)標記多肽,、抗體,、抗原、蛋白等服務(wù)