產(chǎn)品名稱：TRIZOL REAGENT生化試劑

品牌：Invitrogen

貨號(hào)：15596-026

規(guī)格：100ML

優(yōu)惠價(jià)格：請(qǐng)致電

包裝：TRIZOL溶液,棕色瓶裝

現(xiàn)貨狀態(tài)：現(xiàn)貨

TRIZOL REAGENT生化試劑 Invitrogen原裝TRIZOL REAGENT（貨號(hào)：15596-026）操作說(shuō)明：

從組織中提取總RNA 1)液氮研磨,，組織塊直接放入研體中,，加入少量液氮，迅速研磨,，待組織變軟,，再加少量液氮，再研磨,，如此三次,，按50-100mg組織/mlTrizol加入Trizol，轉(zhuǎn)移入離心管進(jìn)行第2步操作,。2) 勻漿：組織樣品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol,，另外，組織體積不能超過(guò)Trizol體積的10%，否則勻漿效果會(huì)不好,，用電動(dòng)勻漿器充分勻漿約需1-2分鐘,。從細(xì)胞中提取總RNA   1) 培養(yǎng)貼壁細(xì)胞：不須消化，可直接用Trizol進(jìn)行消化,、裂解,，Trizol體積按10cm2/ml比例加入。   2) 懸浮細(xì)胞可直接收集,、裂解,，每1ml Trizol可裂解5×106動(dòng)物、植物或酵母細(xì)胞,，或107細(xì)菌細(xì)胞,。   2．細(xì)胞或組織加Trizol后，室溫放置5min,，使其充分裂解,。注：此時(shí)可放入-70℃長(zhǎng)期保持。  3．12000rpm 離心5min,，棄沉淀,。  4．按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿，振蕩混勻15分鐘,，室溫放置15min,。注：禁用漩渦振蕩器，   以免基因組DNA斷裂,。  5．4℃12000g離心15min,。   6．吸取上層水相，至另一離心管中,。  注：1）千萬(wàn)不要吸取中間界面,。   2)若同時(shí)提取DNA和蛋白質(zhì)，則保留下層酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,，則棄下層酚相,。  7．按0.5ml異丙醇/ml Trizol 加入異丙醇混勻，室溫放置5-10min,。  8．4℃ 12000g離心10min,，棄上清，RNA沉于管底,。   9．按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇,，溫和振蕩離心管，懸浮沉淀,。  10．4℃ 8000g離心5min,，盡量棄上清,。   11．室溫晾干或真空干燥5-10min。注：RNA樣品不要過(guò)于干燥,，否則很難溶解,。  12．可用50ul H2O，TE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品,，55-60℃5-10min,。  注：H2O、TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓,。  12,、測(cè)O.D值定量DNA濃度。   注：1）此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之間,。  2) 產(chǎn)率估計(jì)：組織標(biāo)本：（ug RNA/mg組織）1-10ug,，培養(yǎng)細(xì)胞（ug RNA/106 Cell）：5-15ug。  

注：1,、組織或細(xì)胞量過(guò)少,，可酌情減少Trizol用量。 

    2,、組織或細(xì)胞用量過(guò)多,，會(huì)引起DNA對(duì)RNA的污染。  

    3,、高蛋白,，脂肪或多糖類組織,，肌肉組織或塊狀植物組織等,，組織勻漿或液氮研磨  后須4℃ 1200離心10min去掉不溶物，再進(jìn)行下面操作,，若頂層有脂肪物,，則  也須去掉。 

    4,、熱天提RNA,，帶手套是必須的，手是RNase的主要來(lái)源,。  

    5,、組織塊用液氮研磨，效果,，若沒(méi)有液氮或電動(dòng)勻漿器,，可用手動(dòng)勻漿器代替，此時(shí)組織塊不宜過(guò)大,，且需先用眼科剪將組織絞碎,，然后再充分研磨,。

另有：invitrogen TRIzol:emoji: Reagent 15596018 200ML 包裝試劑，更多優(yōu)惠 盡在韻涵生物,！