ELISPOT酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)使用

淋巴細(xì)胞受到抗原刺激后局部產(chǎn)生細(xì)胞因子，此細(xì)胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(預(yù)包被的)的特異性單抗捕獲,。去除細(xì)胞后,，被捕獲的細(xì)胞因子與Biotin標(biāo)記的單抗結(jié)合，其后再與堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素結(jié)合,。加底物顯色后,，PVDF膜上出現(xiàn)紫色或紅褐色的斑點表明細(xì)胞產(chǎn)生了細(xì)胞因子，通過酶聯(lián)免疫斑點分析儀（ELISPOT Reader）對斑點的進行自動計數(shù)和分析,。

德國biosys由化學(xué)家兼工程師Werner Freber創(chuàng)建于1986年,，專注于 EliSpot酶聯(lián)免疫斑點計數(shù)和定量自動化檢測分析設(shè)備30多年，biosys公司的立體3D雙光照明（增強斑點與背景的對比度,，有效抑制板孔側(cè)壁反光造成的“幻影現(xiàn)象”,，提高檢測度），能進行單斑點,、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng),，解決了ELISPOT斑點計數(shù)的快速化，標(biāo)準(zhǔn)化和斑點信息的詳細(xì)化,，并且可以對細(xì)胞因子進行定量分析,，是能進行單斑點、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng),，獲得應(yīng)用于ELISPOT斑點識別的3D雙光源技術(shù),，實現(xiàn)對ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好識別，個采用改進機械結(jié)構(gòu)的前置式載物臺和自動開關(guān)密閉檢測室,，同一孔中同時識別多至12色ELISPOT斑點,，實現(xiàn)熒光ELISPOT檢測，歐盟科技項目,產(chǎn)品成熟,，30年歷史,，1000多家實驗室使用，國內(nèi)近百家單位使用,，已成為熒光/Elispot酶聯(lián)免疫斑點檢測分析的金標(biāo)準(zhǔn),。

世聯(lián)博研北京科技有限公司是德國BIO-SYS包含bioreader酶聯(lián)免疫斑點分析儀和biocount病毒菌落計數(shù)儀在內(nèi)全系列產(chǎn)品在中國大陸、香港,、澳門,、中國臺灣區(qū)域總授權(quán)代理商,，為廣大科研用戶提供BIO-SYS全系列產(chǎn)品提供售前、售中和售后服務(wù)

Biosys酶聯(lián)免疫斑點圖像計數(shù)和分析產(chǎn)品特點：

●立體3D雙光照明系統(tǒng)：

增強斑點與背景的對比度,，有效抑制板孔側(cè)壁反光造成的“幻影現(xiàn)象”,，提高檢測度。能進行單斑點,、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng),。
● 彩色成像及分析系統(tǒng)：

高分辨率2340×2000 分辨率SONY fire wire真彩數(shù)碼成像系統(tǒng)，可進行雙色或三色Elispot實驗結(jié)果的檢測,。也適用于病毒斑(Viral Plaque),、克隆形成(CFU)、腫瘤細(xì)胞集落形成（HTCFA）,干細(xì)胞集落形成試驗等,。  數(shù)據(jù)量高達(dá)5M 的圖像數(shù)據(jù)（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能, 一體化HP 20’ 液晶顯示器.
● 高精度X－Y定位載板臺：

采用高精度齒輪步進電機,，避免了皮帶輪步進電機的打滑和老化，定位精度<0.01mm,。

高精度微步進電機,、齒輪傳動方式、樣品架移動精度< 0.01mm
● 通用性強：

適用各種載玻片,、35-100mm培養(yǎng)碟,、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培養(yǎng)板。對于實驗室常用的U-Cytech,、MILLIPORE,、NUNC,、 Whatman,、Greiner等公司的透明培養(yǎng)板、不透明（白色）培養(yǎng)板,、以及PVDF膜培養(yǎng)板均適用,。
● 自動聚焦：

需進行不同類型培養(yǎng)板的檢測時，無須手動調(diào)焦,，轉(zhuǎn)換更為方便,。
●高靈敏性，高特異性的優(yōu)點：

動態(tài)“像素周圍識別”,，模糊,、彌散、過大,、過小斑點以及高背景或不規(guī)則背景均可檢測,。
●高分辨率：

每孔可檢測多至2000個斑點，直徑>3m 的斑點即可被有效檢測（通常設(shè)定檢測的斑點大小為20-50m）,。
●邊沿識別系統(tǒng)：

尤其針對透明板,、白色PVDF板,，可有效識別板孔邊緣，保證整個板孔的計數(shù),。
●光密度值測定：

應(yīng)用ELISA透光測量原理,，可對每個斑點，每個孔進行光密度值測定,，定量分析細(xì)胞因子分泌,。
●*的WASHOUT背景補償功能：

對于背景重的培養(yǎng)板孔可進行自動背景補償調(diào)節(jié)。
●測量結(jié)果可信：

已經(jīng)過MABTECH, U-Cytech, Diaclone, Pharmingen, R&D等公司ELISPOT產(chǎn)品的驗證,，測量結(jié)果可信度高,。
●用戶自定義參數(shù)和再分析：

用戶可根據(jù)試驗情況設(shè)置斑點識別參數(shù)，直接重新分析已掃描數(shù)據(jù),，不必重復(fù)掃描,。相同參數(shù)下分析結(jié)果可重復(fù)性為+/-*。
●“One－Click”測量區(qū)域選擇：

直觀的板孔選擇界面,，可輕松進行單孔,、任意孔區(qū)域、全板掃描,。
●智控分析方式：

用戶可手動選擇需去除的斑點,，自定義需去除的破損區(qū)域或無法識別區(qū)域，測量結(jié)果更可信,。
●數(shù)據(jù)分析全面：

包括培養(yǎng)孔原始數(shù)據(jù)如每孔斑點數(shù),、斑點幾何形狀（直徑、圓度,、曲率,、毛糙度）參數(shù)、每個斑點坐標(biāo),、光密度（提示細(xì)胞因子量）等以及樣本均數(shù),、方差、統(tǒng)計學(xué)分布等多種統(tǒng)計數(shù)據(jù)和分析圖表,。
●直接輸出模式：

可將整板圖像,，單孔圖像，每孔斑點數(shù),，斑點詳細(xì)數(shù)據(jù),、分布、和統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果直接輸出到Word,、Excel,、Powerpoint?？蛇x擇HTML,BMP, JPEG, PDF等多種格式,。
●檢測快速：超高精度掃描每個培養(yǎng)板約需12-15分鐘,；快速掃描每個培養(yǎng)板約需6-8分鐘 。
● 歐盟CE認(rèn)證,、符合21 CFR PART 11認(rèn)證要求

●歷史悠久,，產(chǎn)品成熟度高、文獻(xiàn)量大：

30多年歷史驗證,，1500多個實驗室成功使用,，國內(nèi)有50多的單位成功使用，無技術(shù)和應(yīng)用風(fēng)險,。

應(yīng)用范圍：

單細(xì)胞解析度/體外抗原特異性T細(xì)胞頻率的準(zhǔn)確測量,，細(xì)胞因子協(xié)同表達(dá)/雙色ELISPOT,，腫瘤免疫，T細(xì)胞功能研究,，移植免疫等,；對探索免疫系統(tǒng)疾病的發(fā)病機制和腫瘤免疫細(xì)胞治療評價具有重要意義。

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