一、實驗原理

所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。 有關他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應功能的分子機制剛剛開始研究,。 外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊,，對外泌體的研究興趣日益增長,，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。

外泌體（Exosome）主要檢測指標為CD63,、CD9,、CD81、Tsg101,、Alix,、HSP70等，針對外泌體的定性檢測,，至少選擇2-3個指標就能滿足文章發(fā)表就可以,。大部分文獻中沒有檢測內參，個別文章中使用了Actin,、GAPDH和Tubulin作為內參進行檢測,，外泌體中的Actin、GAPDH和Tubulin的表達豐度相對于正常細胞樣品中的較低,，可能會檢測不到任何條帶或者條帶微弱,。

二、實驗流程

1. 外泌體BCA法定量。

2. 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳（SDS-PAGE）,。

3. 蛋白質轉移到PVDF膜,。

4. 膜的封閉和抗體孵育。

5. 結果檢測,。