人波形蛋白(VIM)試劑盒

類(lèi)別簡(jiǎn)介:"專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口胎牛血清,、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒,、細(xì)胞,、抗體、生物試劑,、耗材,、培養(yǎng)基、一抗,、二抗,、其產(chǎn)品吸附均勻，吸附性好,，空白值低,，孔底透明度高， 代做ELISA實(shí)驗(yàn)等,。"

供應(yīng)商 :乾思生物

貨期 :7-10天

完整的ELISA試劑盒包含以下各組分： (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑),； (2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)； (3)酶的底物,； (4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中)； (5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液,； (6)洗滌液,，在板式ELISA中,，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水； (7)酶反應(yīng)終止液,，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,，其濃度按加量及比色液終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L,。主要包括37000多種一抗,，1689種二抗，61種標(biāo)簽和標(biāo)記物及42種試驗(yàn)小包裝產(chǎn)品,。（部分產(chǎn)品如下表）
一抗主要涉及抗人,、小鼠、大鼠和兔的多種抗體,，以兔抗為主,，適用于ELISA，WB和IHC-P等試驗(yàn),。為客戶(hù)利益著想還特別提供了幾十種常用抗體的20μg試驗(yàn)小包裝,。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)：熒光定量pcr服務(wù)、hplc(高效液相色譜法檢測(cè))服務(wù),、emsa(凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn))、酶聯(lián)免疫(elisa)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),、免疫組化(ihc)技術(shù)服務(wù),、rna干擾(sirna,miran)、雙向電泳,、免疫共沉淀,、科研整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)、流式細(xì)胞檢測(cè)服務(wù),、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù),、四甲基偶氮唑鹽比色法(mtt方法、sci生物醫(yī)學(xué)論文服務(wù),、熒光原位雜交fish服務(wù),、載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、抑制性消減雜交(ssh)技術(shù)服務(wù),、單核苷酸多態(tài)性分析(snp)檢測(cè)服務(wù),、real-timepcr實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。

◇      液體類(lèi)標(biāo)本:標(biāo)本必須為液體,，不含沉淀,。包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測(cè)種類(lèi),。

◇      血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

◇      血漿：應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。

◇      尿液,、胸腹水、腦脊液：用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

◇      組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量,。加入一定量的PBS,，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用,。注：（1）各種試劑禁忌常年續(xù)加,；

（2）同一品牌不同批號(hào)的試劑不能混用；
（3）續(xù)加試劑后要重新定標(biāo),，標(biāo)準(zhǔn)液即開(kāi)即用,；
（4）不同廠家的試劑禁用同一標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)；
（5）質(zhì)控必須用高,、中,、低值三個(gè)樣本每天隨患者標(biāo)本測(cè)定；
(6) 抗凝劑的使用,；
(7) 校準(zhǔn)液的正確使用,。如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無(wú)菌操作,，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液,，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn),，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,，鎂離子）洗1-2次,。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散,，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,，吸出,，分到新的培養(yǎng)瓶中,。一傳二。傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的,，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。