48T/96T 2,3-二磷酸甘油酸ELISA試劑盒
- 公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 48T/96T
- 產(chǎn)地 進口,、國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2020/9/8 13:07:51
- 訪問次數(shù) 2440
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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 48T/96T |
貨號 | GOY-H8492 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
產(chǎn)品名稱: 2,3-二磷酸甘油酸ELISA試劑盒
英文名稱:Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃
運輸條件:低溫運輸,,用干冰或者冰袋低溫運輸。
待檢樣本:體液,、血清,、血漿、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液,、組織勻漿、心房水標本等等,。
2,3-二磷酸甘油酸ELISA試劑盒Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA Kit 具有靈敏度高,、特異性強、重復(fù)性好的特點,。公司產(chǎn)品品種齊全,,質(zhì)量可靠,擁有完善的售前 售中 售后服務(wù)體系,。人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒 48T/96T,。
準備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:產(chǎn)品僅用于科研血清、血漿(EDTA ,、檸檬酸鹽,、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿等盡早檢測,, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,,避免反復(fù)凍融,。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 ,。 設(shè)標準 管 8 管,,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,,移至第二管 ,。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去,。第八 管 為空白對照,。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘,。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干,。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul ,。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前,。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul ,。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前,。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻,。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值,。
性能:
1. 準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900,。
2. 靈敏度:檢測濃度小于0.1 U/mL,。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存,。
6. 有效期:6個月
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。*,酶是一種有機催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
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實驗規(guī)則:
1,、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%,??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正,。
2,、要配備20ul,、50ul、100ul,、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,要更換槍頭,。即使是吸取標準品時,。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4,、實驗時,,要使底物避光保存。
5,、用槍吸取液體時速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6,、吸取液體時,,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
7,、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會自然流下去。
8,、液體全部加完后,,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,。也可以用酶標儀的晃動功能,。
9、應(yīng)盡量做雙孔實驗,,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性,。
10、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證,。