Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector

Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector

Dnmt1染色體體的小尺寸可產(chǎn)生高信噪比,，以產(chǎn)生令人震驚的高分辨率圖像或染色質(zhì)甲基化動力學的定時電影,。值得注意的是，它對甲基化模式?jīng)]有影響,，并且在大多數(shù)細胞類型中均表現(xiàn)出極低的毒性,。只需用Dnmt1 Chromobody質(zhì)粒轉(zhuǎn)染您選擇的細胞系即可。該質(zhì)粒包含與TagRFP或TagGFP（Evrogen）融合的Dnmt1特異性羊駝抗體的序列,。轉(zhuǎn)化后,，您的細胞將表達Dnmt1染色體抗體。由于熒光體分子特異地定位于DNA甲基轉(zhuǎn)移酶,，因此細胞核將發(fā)出擴散和點狀的熒光,。

Dnmt1染色體在細胞中的實時可視化

用Dnmt1-Chromobody質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HeLa細胞，并在生長和分裂過程中對其進行觀察,。每30分鐘對細胞成像24小時,?？笵nmt1-TagRFP染色體抗體將DNA甲基轉(zhuǎn)移酶與細胞核結(jié)合。在G期細胞中,，信號通過細胞核和細胞質(zhì)均勻分布,。隨著時間的流逝，在S期,，顆粒以復制灶的形式出現(xiàn)在細胞核中,，后顆粒消失，細胞分裂,。

在整個細胞周期中,，Dnmt1-Chromobody轉(zhuǎn)染HeLa細胞的靜態(tài)圖像。這次,，使用抗Dnmt1-TagGFP融合蛋白,，隨著細胞通過S期，復制灶的形成可以看成亮綠色的點,。Dnmt1-Chromobody不影響正常細胞功能,。

染色體將您的細胞變成免疫報告工廠

納米抗體是*的小抗體片段，表現(xiàn)出與靶蛋白的超高效結(jié)合,。在動物細胞中表達的納米抗體可以被收集并用于體外研究,。當納米抗體表達為與報告分子（例如GFP）的融合體時，發(fā)生了一些出乎意料的事情,。新形成的染色體抗體直接與目標細胞內(nèi)的靶標結(jié)合,。而且，使用正確的載體和啟動子,，結(jié)合具有高特異性和低背景,。這為GFP-融合與感興趣的蛋白質(zhì)的免疫定位研究提供了*的選擇。為什么,？因為已經(jīng)顯示了GFP和RFP融合可以阻斷或改變?nèi)诤系鞍椎幕钚?。相反?/p>