Cell Cycle Chromobody Immunodetection Vector

Cell Cycle Chromobody Immunodetection Vector

使用細(xì)胞周期染色體體實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)

穩(wěn)定表達(dá)與綠色熒光蛋白TagGFP2融合的細(xì)胞周期染色體的HeLa細(xì)胞系,。

穩(wěn)定表達(dá)與紅色熒光蛋白TagRFP融合的細(xì)胞周期染色體的U2OS細(xì)胞系

上面的面板顯示了細(xì)胞周期染色體抗體-GFP2在36小時(shí)的時(shí)間過程中清楚地跟隨細(xì)胞的過程，在此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了兩輪分裂,。次分裂后,，子細(xì)胞在10小時(shí)左右進(jìn)入S期，顯示出PCNA的特征點(diǎn)狀模式,。29小時(shí)標(biāo)記顯示其中一個(gè)子細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂（前期）,，第二個(gè)緊隨其后的是在第30小時(shí),。對(duì)于活細(xì)胞成像，將細(xì)胞接種在ibidi µ-玻片中,。時(shí)間序列是在配備有63x / 1.4 NA Plan-Apochromat油浸物鏡以及加濕,，受溫度和CO2控制的活細(xì)胞室的旋轉(zhuǎn)圓盤顯微鏡（UltraVIEW VoX，PerkinElmer）上獲得的,。TagGFP2用488 nm激光線激發(fā)通常在100-500 ms /圖像之間,，激光強(qiáng)度設(shè)置為max。25％,。每30分鐘以1000×1000像素的幀大小,，100 nm的像素大小和400 nm的z步長(zhǎng)大小記錄活細(xì)胞的共聚焦圖像z堆棧。所顯示的圖像是幾個(gè)Z軸中間部分的大強(qiáng)度投影,。