兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

商品屬性：

細胞簡介：

兔骨髓樹突狀分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌,、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大，脂肪細胞增多,，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導(dǎo)而成的,；樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,，典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長，在GM-CSF,、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,，細胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多,，亦可見少量短刺狀突,，胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強的遷移能力,，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細胞,，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα,、LPS等誘導(dǎo)而成,，多數(shù)呈懸浮生長， 細胞呈圓形，細胞體積進一步增大,，表面大量粗細不等的樹枝樣突起（高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ）,，伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟,。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,，主要通過形態(tài)學、組合性細胞表面標志,、在混合淋巴細胞反應(yīng)中能激活初始T細胞等特征進行鑒定,。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復(fù)合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子,，進而激活T淋巴細胞,，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動,、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化,、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答，不能激活T細胞的第二信號,，可導(dǎo)致T細胞無能,，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80,、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,，一般在30%以下,。

方法簡介：

實驗室分離的兔骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導(dǎo)而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的兔骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細胞形態(tài)等綜合鑒定,，純度可達80%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁半懸浮

細胞形態(tài)：圓形,、梭形、多角形,，形態(tài)多樣

傳代特性：屬于高度分化細胞,；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

兔骨髓樹突狀 (未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人足盂蛋白(PCX)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human PCX (Podocalyxin) ELISA Kit

人組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TPA (Tissue Polypeptide Aigen) ELISA Kit

人組織多肽特異性抗原(TPS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TPS (Tissue Polypeptide Specific Aigen) ELISA Kit

人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit

DIRAS2蛋白抗體

高遷移率族蛋白2抗體

CXCL2重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽) Protein

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)

ADAMTSL1重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

EDA2R Pro僀?僀

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

CXCL2重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽) Protein

EDA2R Protein Rat 重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標簽)

ADAMTSL1重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein

豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 ，英文名： TNF-α ELISA Kit

Human protein kinase C (PKC) ELISA Kit 人蛋白激酶C(PKC)試劑盒

Monkeyα1-microglobulin,α1-MGELISAKitα1微球蛋白(α1-MG)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforBMP-6ELISAKit大鼠骨形成蛋白6

細菌鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 試劑盒

Human vitamin A (VA) ELISA Kit 人A(VA)試劑盒

HumanCathepsinK,cath-KELISAKit 人組織蛋白酶K(cath-K)pcr檢測試劑盒分裝

HumancecropinB,CecB試劑盒人殺菌肽B(CecB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米GA21品系試劑盒20次

HumanSerumamyloidP,，SAPELISAKit人血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細胞換液,；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；

　　2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗,；

　　4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；

　　5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行